鹰嘴豆异黄酮和皂苷的同步提取、分离纯化及其降糖调脂作用的研究

目的:从鹰嘴豆中同步提取出异黄酮和皂苷,对其进行分离纯化及分析鉴定,在此基础上验证其对糖尿病(diabetes mellitus, DM)小鼠降血糖、调血脂的作用,并观察其对机体氧化-抗氧化状态的影响以探讨其降糖、调脂的作用机理。 方法:(1)依据异黄酮和皂苷的理化性质,选择合适的提取溶剂和提取方法,设计单因素实验及正交实验,制定出同步提取CI和CS的最佳工艺,并通过对比实验选取有效方法对粗提物进行脱脂、脱蛋白的初步除杂处理。(2)依据异黄酮和皂苷各自的理化性质,选择合适的吸附柱对其进行初步分离和富集,在此基础上对有机溶剂沉淀法和柱色谱法进行对比,筛选出最佳的精制方法,以得到满意纯度的CI和CS产品,并从一般性质、颜色反应及紫外特征吸收几个方面对其进行分析鉴定。(3)建立理想的DM2模型,对CI和CS降血糖、调血脂的作用进行验证,并进一步观察其对DM小鼠体内氧化-抗氧化状态的影响,在此基础上探讨其降糖调脂的机理。 结果:(1)以乙醇为溶剂回流浸提的方式能有效地进行CI和CS的同步提取。(2)同步提取CI和CS的最佳工艺为:70%乙醇、固液比:1:10、水浴温度70℃、浸提时间3h,浸提两次。(3)冷冻离心法和等电点法是对粗提物进行脱脂、脱蛋白的理想方法。(4)H103树脂柱和HPD-600树脂柱能有效去除糖、盐等水溶性杂质,有效地富集CI和CS,并达到一定的纯化效果。(5)聚酰胺柱层析法优于化学溶剂沉淀法,能较好的分离、纯化CI和CS,得到纯度较为满意的CI和CS产品。(6)先喂以高糖高脂饮食,再继以低剂量的STZ的方法能成功建立理想的DM2模型,此模型是研究DM2及其血管并发症的理想模型。(7)CI和CS对DM小鼠有明确的降血糖和调血脂的功能,可在一定程度上改善DM小鼠“三多一少”现象。且CS在提高血清HDL-C方面的作用尤为显著,CI在降低血清TG方面的作用尤为突出。(8)CI和CS能增强DM小鼠机体抗氧化酶类活性,降低DM小鼠体内过氧化产物的含量,这可能是其降血糖、调血脂的作用机制之一。 结论:异黄酮和皂苷可能是鹰嘴豆中主要降血糖、调血脂的成分,而增强机体的抗氧化能力可能是其降糖、调脂的主要机制。