黄连解毒汤抗疱疹病毒物质基础研究

黄连解毒汤是清热解毒方中的经典方剂，本方由黄连（九克）、黄芩（六克）、黄柏（六克）、栀子（九克）四药组成，具有清热泻火解毒之功效，主治一切实热火毒、三焦热盛之证。对黄连解毒汤有效组分药液进行体外抗病毒实验发现其对11种病毒有不同程度的抑制作用，尤其对疱疹病毒Ⅰ、Ⅱ效果最佳，确定为有效部位群。本论文分三部分对黄连解毒汤抗疱疹病毒物质基础进行研究。 第一部分黄连解毒汤的文献综述研究。分别对全方及单味药的药剂学，药理学及所含化学成分进行综述，共引用文献70篇。 第二部分黄连解毒汤的实验研究。 1 对黄连解毒汤抗疱疹病毒有效部位群进行提取、分离，得到13个单体化合物，运用各种色谱、光谱(包括UV、IR、EI-MS、FAB-MS、HR-MS、1HNMR、13CNMR等)技术或化学方法鉴定了其中的11个。其中生物碱三个，分别是小檗碱、巴马亭、药根碱、黄酮及黄酮苷三个，分别是黄芩苷、汉黄芩素、木犀草素。有机酸三个，分别是绿原酸，熊果酸、藏红花酸。环烯醚萜苷一个，为栀子苷。甾醇一个，为β-谷甾醇。此11个化合物均为首次从黄连解毒汤中得到，经文献检索知小檗碱、巴马亭、药根碱来源于黄连、黄柏；黄芩苷、汉黄芩素来源于黄芩；有机酸类和栀子苷来源于栀子；β-谷甾醇在黄芩、黄柏、栀子中均存在；其中木犀草素为首次从该复方中得到，且所组成的四味单味药也未见报道分离得到此成分。 2 初步建立了黄连解毒汤抗疱疹病毒有效部位群的高效液相图谱，通过分析比较发现有28个色谱峰是供试品所共有的，通过单味药黄连、黄柏、黄芩、栀子及阴性相应部位与全方有效部位群HPLC色谱图的比较，基本确认了各峰的归属，并通过单味药黄连、黄柏相应部位的HPLC色谱图的比较，用HPLC色谱图将二者区分。通过与标准品对照确认峰14为黄芩苷，峰16为小檗碱，峰12为药根碱，峰15为巴马亭。 3 对黄连解毒汤抗疱疹病毒有效部位群的总生物碱进行了含量测定，小檗碱标准曲线为y=63.525x+0.0081，r=0.9997，表明小檗碱在范围4.0-20.0mg／mL之间与吸收度之间呈良好的线性关系。测得全方有效部位群沉淀部分含量为21.46％，RSD为0.87％，全方有效部位群大孔树脂柱醇洗部分为8.80％，RSD为2.73％，计算得全方有效部位群总生物碱含量为13.89％。单味药黄连相应部位总生物碱含量为51.34％，单味药黄柏相应部位总生物碱含量为9.82％，计算得黄连、黄柏对全方的贡献分别为15.02％、1.16％。并建立了黄连解毒汤抗疱疹病毒有效部位群中黄芩苷、栀子苷的HPLC定量分析方法：栀子苷回归方程为y=126502x+99484，r=0.9995。表明栀子苷在范围0.572-1.716μg之间具有良好的线性关系，测得 2＆连解赶汤抗泡疹j山啦物质沾础研冗 全方有效部位群沉淀部分中桅子菩含量极低，全方有效部位群大孔树脂柱醇洗部 分中桅子普含量为13．31％，RSD为0．19％，力样回收率为102．5％，RSD为1．sl％， 计算得全方有效部位群中桅子苦含量为7．96％；黄冬普回归方程为 g＝279214x－22079，r二0．9992。表明黄芬普在范围 2．02－18．18 u g之问具有良好 的线性关系。测得全方有效部位群沉淀部分中黄苏苦含量为18．7汛，RSD为2．03儿 全方有效部位群大孔树脂柱醇洗部分中为4．04兄RSD为3．60兄计算得全方有效 部位群中黄芍苦含量为 9．96％。加样回收率为 99．2巩 RSD为 1．94览 第三部分 对各实验结果进行分析讨论。