黄柏炮制原理研究

黄柏为芸香科植物黄皮树Phellodendron chinense Schneid.的干燥树皮。该药苦、寒。生用或炮制应用。具有清热燥湿,泻火除蒸,解毒疗疮之效。 本文为“十一五”国家科技支撑计划课题“中药炮制共性技术与相关设备研究”(2006BAI09B06)“盐炙共性技术研究”的内容之一。本文对黄柏的炮制目的、传统和现代文献、化学成分、药理药效、炮制工艺、质量标准等方面进行了深入系统的研究,通过比较黄柏炮制前后化学成分质与量的变化、药理作用的差异性等,揭示了黄柏的炮制原理,并建立黄柏盐炙法的工艺评价标准和相应饮片的质量评价标准,为黄柏的临床应用及质量标准的建立提供了科学依据。 通过古代和现代炮制文献研究,归纳总结了古今黄柏的多种炮制方法及炮制目的,在此基础上对多种炮制方法进行了比较研究,为确立科学合理的研究方案提供了新的思路。 通过黄柏炮制前后化学成分的对比,确定黄柏在炮制后其化学成分发生了质的变化——其主要的活性成分盐酸小檗碱的含量降低,并转化生成了小檗红碱。比较研究了盐酸小檗碱单体及其在黄柏药材中转化的条件及规律。结果显示盐酸小檗碱单体在130℃加热10分钟就开始有微量小檗红碱生成,且随着加热温度的升高和时间的延长,小檗红碱的含量先是呈现上升趋势,后又逐渐下降。在黄柏药材中,由于药材细胞壁的保护作用及其所含各种化学成分的相互影响,小檗碱的转化要比其单体需要更高的温度和更长的时间。在170℃前,小檗碱单体转化为小檗红檗的转化率要高于药材;但超过了该温度,黄柏药材中小檗碱的转化率要高于其单体;并进行了盐酸小檗碱的转化机理研究。为制定黄柏的最佳炮制工艺及解释其炮制原理提供了科学的依据。 在黄柏盐制工艺的研究中,先对黄柏盐制过程中的影响因素进行了单因素考察,结果表明,辅料盐的加入可使盐制黄柏的有效化学成分更好的溶出。确定了影响黄柏盐制工艺的影响因素分别为炒制时间和温度、加盐量和闷润时间。采用L9(34)正交实验,以小檗碱、小檗红碱及两者含量之和变化为指标进行综合评分,优选出盐制黄柏的最佳炮制工艺为:每100kg黄柏加入盐5kg,以药材量30%的水溶解盐;闷润1hr,在150～160℃条件下炒6分钟。并进行了实验室放大实验验证,结果表明工艺合理可行。并探讨了用微波技术来炮制盐黄柏的可行性,制定了微波法盐制黄柏的最佳炮制工艺。为中药炮制新方法的探索,提供了科学的依据。 通过在显微、薄层和HPLC的方面的比较研究,初步比较了黄柏及关黄柏在化学成分上的差异。结果显示,黄柏中所有的盐酸小檗碱的量远高于关黄柏,但关黄柏中所含有的巴马丁的量要高于黄柏;并建议加强两者药理药效方面的比较研究,以更好的为临床服务。 完成了黄柏及盐制黄柏的质量标准及起草说明。建立了黄柏及其炮制品中盐酸小檗碱、小檗红碱的含量测定方法。并进行了显微鉴别、薄层鉴别、水分、灰分、残留农药、重金属及有害元素等指标的测定。 传统的炮制理论认为,黄柏生用苦燥性寒,炮制后可缓和其苦燥之性。本文考察了黄柏生品与各种炮制品对动物胃肠的作用。实验结果表明,生品组与空白组及各炮制组相比,小鼠体重增加缓慢,胃残留率升高,胃肠推进率下降,对大鼠的胃液分泌有较大影响,表现为胃液分泌量减少,胃液pH值降低,总酸度、总酸排出量及胃蛋白酶活性显著下降。结合化学成分的研究,验证了黄柏中所含有的盐酸小檗碱是其“苦燥性寒”的物质基础。 对糖皮质激素型肾阴虚模型的大鼠进行了尿液量、尿液渗透压、大鼠血液中皮质醇、血管升压素(AVP)、cAMP的检测和大鼠髓质水通道蛋白2(AQP2)免疫组化的比较。结果表明黄柏及其各炮制品均可增加大鼠的尿液量,降低尿渗透压;可降低肾阴虚大鼠血液中皮质醇、血管升压素(AVP)、cAMP的水平;可明显增加AQP2的灰度值。表明黄柏生品和炮制品均有滋阴的作用,特别是盐制品,滋阴效果确切有效。 在抗痛风的实验中,从大鼠中血液中尿酸及肌酐的水平其在治疗急性关节炎两方面初步观察了黄柏及其不同炮制品的抗痛风作用。结果表明黄柏生品及其炮制品都具有抗痛风的作用,但生品及各炮制品之间无显著性差别。