鱿鱼墨多糖对环磷酰胺所致小鼠肠道黏膜上皮细胞损伤的保护作用研究

环磷酰胺是临床上常用的化疗药物，它在发挥抗肿瘤作用的同时常引发胃肠道不良反应，造成胃肠道黏膜损伤。临床上利用药物治疗胃肠道反应具有一定局限性。鱿鱼墨是丰富易得的海洋生物资源，有着悠久的药用历史。鱿鱼墨的主要成分为黑色素和蛋白多糖复合体。近年来，鱿鱼墨多糖被证实具有多种生理活性，如增强免疫力、抗肿瘤活性等。本文主要目的是探讨鱿鱼墨多糖对环磷酰胺所致肠道黏膜上皮细胞损伤的保护作用，为开发以鱿鱼墨多糖为功效因子的保健食品、改善化疗药物所致胃肠道黏膜损伤提供理论依据。 论文主要包括三部分内容： 第一部分：提取鱿鱼墨多糖及利用环磷酰胺建立肠黏膜上皮细胞损伤动物模型。鱿鱼墨经过酶解、乙醇沉淀和三氯乙酸除杂蛋白，提取得到鱿鱼墨粗多糖，得率为1.5%。分析其化学组分含量得出总糖含量为60.99%、总蛋白含量为9.44%。通过预实验确定环磷酰胺造模剂量为连续2天腹腔注射(50mg/kg.bw)；通过预实验确定鱿鱼墨多糖灌胃剂量为低剂量组50mg/(kg.bw)、中剂量组100mg/(kg.bw)、高剂量组200mg/(kg.bw)。 第二部分：研究鱿鱼墨多糖对小鼠肠道黏膜上皮细胞的保护作用。观察小鼠体重变化以及腹泻现象的发生，小肠形态结构的改变及绒毛长度和隐窝深度的改变。研究结果显示环磷酰胺能够对小鼠的小肠黏膜上皮细胞造成严重损伤，而鱿鱼墨多糖的前期摄入可以保护其免受环磷酰胺损伤。进一步研究显示，鱿鱼墨多糖的前期摄入可以提高机体的抗氧化能力、提高细胞间紧密连接蛋白的表达，维持小肠微绒毛形态，从而保护小肠黏膜上皮细胞。 第三部分：研究鱿鱼墨多糖对小鼠肠道潘氏细胞和杯状细胞的保护作用，并对它们的作用机理进行深入的探讨。采用低温WeisserA沉淀法分离和富集得到小肠隐窝和绒毛后，分别研究鱿鱼墨多糖对小鼠肠道潘氏细胞（隐窝）和杯状细胞（绒毛）的影响及作用机理。实验结果显示：环磷酰胺能够降低小鼠肠道潘氏细胞和杯状细胞中抗菌肽的分泌，鱿鱼墨多糖的前期摄入对此具有显著的改善作用。进一步研究显示，鱿鱼墨多糖促进潘氏细胞中抗菌肽的分泌与改善该细胞内质网应激状态有关；而杯状细胞抗菌肽分泌量的提高则与增加了杯状细胞的数量有关。 综上所述，鱿鱼墨多糖对环磷酰胺所致小鼠肠道黏膜上皮细胞损伤具有显著的保护作用，其作用机理与增强肠道抗氧化能力、提高上皮细胞间紧密连接蛋白表达量、改善潘氏细胞内质网应激状态、增加杯状细胞数量有关。本论文研究成果为开发以鱿鱼墨多糖为功效因子的保健食品提供了理论依据，不仅将为化疗所致肠黏膜损伤患者带来福音，而且有利于促进我国鱿鱼墨资源的高值化利用。