小脑神经元中GABAB受体介导的ERK/MAPK信号通路的初步研究

γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)是哺乳动物中枢神经系统中广泛分布的最重要的抑制性神经递质之一。GABAB受体是代谢型GABA受体,属于G蛋白偶联受体家族C,广泛存在于各种神经元的突触前和突触后部位,在脑功能中扮演了重要角色。目前研究表明GABAB通过偶联Gi/o蛋白,影响细胞内的cAMP水平和细胞表面的离子受体来调节细胞的生理功能。目前对GABAB受体介导的下游信号转导机制还不是很清楚。ERK/MAPK信号转导途经是细胞外信号引起细胞核反应的主要的共同信号转导通路,在细胞外信号引起细胞核内基因转录的调控方面具有极其重要的作用。 本课题以小鼠小脑神经细胞(CGN)为研究对象,研究了GABAB受体的激活对细胞内ERK/MAPK信号通路的影响。我们用GABA和GABAB受体的特异性激动剂baclofen刺激小脑神经细胞。结果表明,GABAB受体的激活能够瞬时激活EKR1/2,在刺激10分钟时ERK1/2磷酸化达到最大水平,随后逐渐降低。GABAB受体的特异性抑制剂CGP54626能够阻断GABAB受体介导的ERK1/2的磷酸化。我们用特异性作用于GB2 HD区的激动剂CGP7930激活GABAB受体,发现CGP7930也能够瞬时激活ERK1/2。Gi/o参与了GABAB受体的激活对ERK1/2激活的信号转导,用Gi/o蛋白抑制剂PTX能够抑制baclofen和CGP7930对ERK1/2的激活作用。此外我们还研究了GABAB受体激活后对CREB的影响。实验结果表明,GABAB受体激活后能够瞬时激活CREB,这种激活作用依赖于ERK1/2的激活。 总的来说,我们的研究证实了在CGN细胞中,GABAB受体的激活能够瞬时激活ERK1/2,活化的ERK1/2进一步激活CREB。这一结果为进一步研究GABAB受体介导的MAPKs信号通路的激活提供了一定的研究基础,有助于我们进一步了解GABAB受体介导的信号转导机制以及其功能。