日粮不饱和脂肪酸对乳脂共轭亚油酸（CLA）合成的影响及其机理

本研究在优化乳脂CLA分析方法的基础上,主要探讨了泌乳期和胎次、日粮亚油酸和亚麻酸水平、基础日粮结构及其与日粮亚油酸水平组合、鱼油及其与植物油组合对乳脂CLA合成的影响及其机理。 试验结果表明:（1）采用高速离心或以高速离心结合有机溶剂（正己烷/异丙醇）分离乳脂肪后进行酸碱（HCL/NaOCH3）甲酯化,利用100m长硅胶毛细管柱（HP2560）结合程序升温,能够有效分离检测乳中常规脂肪酸及4种主要CLA（c9t11CLA、t10c12CLA、c9c11CLA和t9t11CLA）异构体,对于乳脂脂肪酸组成没有显著影响,同时提高了奶样前处理的效率。（2）在相同的饲料营养条件下,乳脂CLA含量和CLA-去饱和酶指数存在个体差异,奶牛个体间乳脂CLA含量相差2倍左右。乳脂CLA含量和CLA-去饱和酶指数不受胎次和泌乳日影响,同时与产奶量、乳脂肪产量之间的相关性低。（3）通过豆油和亚麻油调控日粮亚油酸（LA）和亚麻酸（LEA）水平,随着日粮亚油酸含量的增加,低亚油酸低亚麻酸组（LLALEA）、高亚麻酸组（HLEA）、高亚油酸和亚麻酸组合组（HLALEA）组和高亚油酸组（HLA）乳脂中t11 C18:1（TVA）和c9t11CLA含量呈线性增加。与LLALEA组相比,HLEA、HLALEA和HLA组乳脂TVA的含量分别增加1.56g/100g、3.05g/100g和4.71g/100g,而c9t11CLA的含量分别提高2.5、2.8和3.7倍。（4）在不添加脂肪的情况下,随着精料水平的提高,3070CW、3070CCA、5050CCA和6535CCA组日粮十二指肠处TVA的流量分别为7.44、10.33、11.37和12.66g/d（p=0.0926）,而对十二指肠处c9t11CLA的流量和乳脂c9t11CLA含量没有显著影响:当日粮添加不饱和脂肪后,高精料高亚油酸组（HCFAT）、低精料高亚油酸组（LCFAT）、高精料低亚油酸组（HCCK）和低精料低亚油酸组（LCCK）乳脂c9t11CLA含量分别为4.04、4.10、0.58和0.76%（p<0.01）,乳脂TVA的含量分别为5.80、5.53、1.08和1.09%（p<0.01）。（5）日粮添加2%的鱼油（FO）后乳脂肪由3.63%降低为2.50%（p<0.05）。日粮添加鱼油（FO）及鱼油和豆油组合（SBFO）后影响牛奶脂肪酸的组成,与对照组（CTL）相比,FO组DHA、TVA和c9t11CLA分别增加了33%、90%和83%（p<0.01）,而SBFO组分别增加了63.6%、91%和87%（p<0.01）。（6）奶山羊日粮添加4%的豆油后引起乳脂肪含量降低约15%,显著降低了脂肪酸的从头合成途径（P<0.001）,乙酰辅酶A羧化酶（ACC）和脂蛋白脂酶（LPL）酶基因mRNA的表达量分别减少了53%和83%;但增加了乳腺对长链脂肪酸的摄取（P<0.001）和血浆（p<0.01）、乳中（p<0.001）TVA和c9t11 CLA的含量,而且乳脂中TVA和c9t11 CLA的含量存在强的线性回归关系（R2=0.8448）。（7）奶牛日粮添加2%～4%的油后有降低乳脂肪含量的趋势（P>0.05）,在亚油酸采食量接近的情况下,通过日粮添加鱼油提高EPA和DHA的采食量后,显著提高了乳脂TVA和c9t11 CLA的含量,但对奶牛乳腺组织SCD基因表达具有抑制作用。 本研究的结果表明:（1）日粮亚油酸、亚麻酸、EPA和DHA的采食量对乳脂CLA的合成以提供乳腺合成c9t11CLA所需的底物（TVA）为主,但亚油酸比亚麻酸能更有效的提高乳脂c9t11CLA的含量,而鱼油源性的长链不饱和脂肪酸主要通过调控其它脂肪酸的代谢而增加乳脂c9t11CLA的内源合成;（2）日粮提供总不饱和脂肪酸的含量是日粮精粗比例影响乳脂CLA合成的前提条件,当日粮总不饱和脂肪酸含量低于2%,尤其是当日粮亚油酸和亚麻酸含量低的情况下,日粮结构对乳脂CLA合成的调控程度有限;当日粮总不饱和脂肪酸含量超过2%时,日粮结构影响牛奶CLA的合成量。