基于小肠特殊转运方式探讨黄连吴茱萸药对配伍机理

为了更好的揭示中药配伍理论的原理,为中药工作者提供解决问题的思路,本文抛砖引玉从最简单但最常用的配伍形式“药对”入手,创新性的另辟蹊径——基于小肠特殊转运方式(P-糖蛋白主动外排)对黄连吴茱萸药对配伍机理进行探讨。 首先查阅文献对相关问题进行了解,了解到小檗碱生物利用度较低、有报道称小檗碱及衍生物为P-gp底物、还有文章对黄连吴茱萸药对配伍的体外研究进行大量报道,但是大多数报道称配伍后成分含量降低,好像和向须相使配伍理论背道而驰。本文结合文献提出新的研究思路——黄连吴茱萸配伍可能在机体体内起作用,然后进行基于小肠特殊转运方式探讨此药对配伍机理的试验设计。整篇文章完成过程简述如下: 第一部分文献综述 对中药配伍理论,药对配伍研究情况;黄连吴茱萸配伍的现代研究概况进行了综述;对药物的小肠吸收及小肠吸收研究方法进行了综述;对p-糖蛋白在药物肠道吸收过程中的作用进行了综述。 第二部分实验研究 1黄连生物碱成分吸收特性的研究本实验考察了浓度、转运方向、P-gp抑制剂对黄连生物碱小肠吸收的影响,研究结果显示:黄连生物碱吸收速率在35～70mg/ml浓度范围内黄连生物碱肠囊吸收速率有饱和趋势;分泌(s-m)方向大于吸收(m-s)方向的转运浓度和转运速率;抑制剂存在组肠囊的转运浓度和转运速率明显高于对照组。通过以上三个实验发现黄连生物碱成分(巴马丁、黄连碱)有和小檗碱相似的吸收特性,由此推断巴马丁和黄连碱可能是P-gp底物。为以后的实验设计和顺利进行奠定基础。 2吴茱萸对黄连生物碱小肠转运的影响 首先在化学成分层面上对黄连吴茱萸不同配伍比例供试液(6:0、6∶1、6∶2、6∶ 3、6∶6)中黄连生物碱含量进行测定,测定结果显示:随吴茱萸配伍比例的增大,黄连生物碱含量有下降的趋势。然后利用非翻转肠囊实验法对不同比例供试液肠囊转运浓度和转运速率进行比较,得出结论:临床上比较常用的配比(6∶1)组的肠囊转运浓度和转运速率最高,高于其它各组。为进一步更好的证明这一结果,接下来设计了验证试验,验证试验结果更加充分的证明了以上结论。 最后利用大鼠在体小肠灌流的方法对不同比例供试液进行实验,很好的监测了6h内小肠对药物的吸收转运过程,实验结果显示:吴茱萸配伍黄连(6∶1)组延长了黄连生物碱的小肠吸收时间,出现了二次吸收。 3吴茱萸对大鼠小肠P-gp功能的影响 本实验利用大鼠的小肠离体肠囊,通过非翻转肠囊法转运实验,研究了吴茱萸对P-gp底物维拉帕米转运的影响。结果显示:吴茱萸维拉帕米浓度在大约12∶5的情况下,吴茱萸能够抑制小肠中P-gp的功能。得出结论:黄连吴茱萸药对配伍中吴茱萸可能作为P-gp抑制剂,改善黄连生物碱的吸收,提高黄连生物碱的生物利用度。第三部分总结和讨论对实验研究中各部分结果进行总结、分析和讨论。