补阳还五汤对实验性糖尿病大鼠肾脏ICAM-1、VCAM-1表达的影响

目的:观察补阳还五汤对实验性糖尿病大鼠血糖(FBG)、一氧化氮(NO)、尿蛋白(Upro)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)等指标的影响,探讨益气活血方药对糖尿病肾损伤的保护作用,从而为该方的临床应用提供科学的实验依据。 方法:将清洁级雄性SD大鼠100只,适应性喂养一周后,分为对照组和造模组。对照组喂养标准饲料,造模组喂以高糖高脂饲料,喂养4周后,禁食12小时,采用腹腔注射小剂量链脲佐菌素复制糖尿病模型。依据“劳则气耗”的中医理论,将造模组大鼠每天在水温(37±0.5)℃,深45cm水桶中游泳,待下沉时捞出,连续2周造成模型大鼠气虚,对照组大鼠适度游泳。后将成模大鼠分为模型组(M)、二甲双胍组(D)、补阳还五汤组(B)、中西药结合组(I),加对照组(C)共分五组。灌胃给药8周,于第8周末留取各组大鼠24小时尿液,用于尿蛋白测定。最后一次给药后,禁食12小时,称重,断头取血,分离血清及血浆,测空腹血糖、一氧化氮。无菌操作取左肾,称重,计算肾重/体重指数(kidney weight/body weight,KW/BW),固定。肾组织,以备肾脏病理形态学观察和免疫组化检测。 结果: 1.补阳还五汤对大鼠FBG的影响 M组大鼠FBG高于C组(P<0.01);三治疗组与M组比较FBG明显降低(P<0.01),I组FBG与D组、B组比较有显著差异(P<0.05、P<0.01)。 2.补阳还五汤对大鼠体重、肾重指数的影响治疗开始时,除C组外其余各组间无显著性差异(P>0.05);用药4、8周后:三治疗组与M组比较大鼠体重明显减轻,差异显著(P<0.05、P<0.01);I组大鼠体重较B组、D组减轻(P<0.05、P<0.01)。 M组大鼠肾重指数较C组显著增高(P<0.01);三治疗组肾重指数较M组明显降低(P<0.01),I组较B组、D组有显著差异(P<0.05、P<0.01)。 3.补阳还五汤对大鼠24小时尿蛋白的影响 M组大鼠24小时尿蛋白较C组显著增高(P<0.01);三治疗组24小时尿蛋白较M组明显降低(P<0.01),I组较B组、D组有显著差异(P<0.05、P<0.01)。 4.补阳还五汤对大鼠NO的影响 M组大鼠NO较C组显著增高(P<0.01);三治疗组NO较M组明显降低(P<0.01),I组较D组有统计学著差异(P<0.05),I组较B组无统计学著差异(P>0.05)。 5.肾组织病理形态学观察 HE染色光镜下可见:正常组(C组):肾小管排列整齐,肾小球毛细血管丛未见扩张,系膜细胞未见增生;模型组(M组)肾小管上皮细胞变性,水肿,脱落,肾小球肥大,系膜细胞增多;三治疗组(D组、B组、I组)较模型组(M组)肾小管上皮细胞损伤显著减轻。 6.免疫组化法检测肾脏ICAM-1、VCAM-1的表达 ICAM-1在C组肾组织中仅微弱表达,而ICAM-1在M组(0.2761±0.0419)与C组(0.0334±0.0248)差异显著(P<0.01),三治疗组(D:0.2085±0.0232、B:0.1678±0.0346、I:0.1252±0.0283)与M组比较有显著性差异(P<0.01),I组ICAM-1表达与D组、B组比较有显著差异(P<0.01); M组大鼠肾组织VCAM-1(0.4270±0.0647)的阳性表达明显增多,与C组(0.0351±0.0249)相比有显著性差异(P<0.01),三治疗组肾组织(D:0.2696±0.0444、B:0.1992±0.0443、I:0.1502±0.0486) VCAM-1的阳性表达较模型组明显减少(P<0.01),I组VCAM-1表达与D组、B组比较有显著差异(P<0.05、P<0.01)。 结论: 1采用过劳、高脂饮食结合小剂量注射链脲佐菌素成功复制糖尿病大鼠模型,此种糖尿病大鼠存在NO、ICAM-1、VCAM-1的表达异常。 2补阳还五汤能够降低肾重指数,减少尿蛋白的丢失,减轻蛋白尿对肾脏损害。 3补阳还五汤能够降低一氧化氮含量,减轻其对肾脏损伤。 4补阳还五汤能够下调ICAM-1、VCAM-1在。肾组织中的相对表达,从而干预糖尿病肾脏病变的发展。 5中西药结合组优于单纯中药和西药组。