中药熏蒸治疗类风湿关节炎疗效及对滑膜HSP70影响的研究

目的：观察中药熏蒸疗法治疗类风湿关节炎(RA)患者、AA大鼠的疗效,检测大鼠关节滑膜中热休克蛋白70(HSP70)表达及人关节滑膜中HSP70mRNA表达的变化,对传统的中药熏蒸疗法治疗RA作出客观评价,进一步阐明中药熏蒸对RA的治疗机理。 方法：1.临床研究：收集2009年2月至2011年3月在广州军区广州总医院中医科住院的RA患者60例,按照随机开放性原则将60例RA患者分为中药熏蒸组(熏蒸组)与非中药熏蒸组(非熏组),非熏组采用常规治疗,即复方丹参注射液20m1静滴1/日、美洛昔康7.5mg口服1/日、甲氨喋呤10mg口服1/周、中医辨证治疗(风湿热痹为痹证1号方,风寒湿痹为痹证2号方,1剂/日水煎服),熏蒸组在常规治疗的基础上加中药熏蒸治疗。治疗1个疗程(20天)之后,比较两组患者治疗前后和两组之间关节症状、体征、中医症状、炎症指标(血沉、C-反应蛋白)、健康评估问卷(HAQ)的变化情况,以及安全指标(血常规、肝肾功能、心电图等)变化。 2.实验研究：选用SPF级雄性Wister大鼠42只,建立大鼠AA模型,将大鼠随机分为正常组、模型组、蒸馏水熏蒸组、低浓度中药熏蒸组、高浓度中药熏蒸组、西药组,每组7只。正常组与模型组大鼠不治疗,蒸馏水熏蒸组、低浓度中药熏蒸组、高浓度中药熏蒸组大鼠分别给予蒸馏水熏蒸、低浓度中药熏蒸、高浓度中药熏蒸,西药组采用双氯芬酸钠喷雾剂治疗,隔天测一次各组大鼠体重及双后肢足肿。一疗程(10天)后,比较各组大鼠体重以及双后肢足肿变化,同时观察各组大鼠关节滑膜组织HSP70的表达量。 3.临床实验研究：收集2010年3月1日至2010年10月1日在广州军区广州总医院中医科及骨科经电子针镜、关节镜手术获取的关节滑膜组织标本15例,其中RA患者10例,分为RA熏蒸组及RA非熏组,每组各5例,非关节炎外伤患者5例。RA非熏组采用常规治疗,即复方丹参注射液20m1静滴1/日、美洛昔康7.5mg口服1/日、甲氨喋呤10mg口服1/周、中医辨证治疗(风湿热痹为痹证1号方,风寒湿痹为痹证2号方,1剂/日水煎服),RA熏蒸组在常规治疗的基础上加中药熏蒸治疗,非关节炎组不给予药物治疗,治疗10天之后,运用FQ-PCR方法检测各组关节滑膜中HSP70mRNA表达量,治疗20天之后,比较熏蒸组和非熏蒸组患者治疗前后和两组之间关节症状、体征、炎症指标(血沉、C-反应蛋白)、健康评估问卷(HAQ)的变化情况。 结果：1.临床研究：治疗20天后两组疼痛VAS评分、关节肿胀度、压痛程度、关节疼痛数目、晨僵持续时间、关节屈伸度、局部温度、中医症候、HAQ、ESR、CRP均较治疗前有显著性差异(P<0.01,P<0.05),熏蒸组在总有效率及达到ACR70改善的百分比上明显高于非熏组(P<0.01)。熏蒸组在患者的关节压痛程度、关节疼痛数、晨僵持续时间和关节局部温度的改善明显优于非熏治疗组(P<0.05),在关节肿胀度和关节屈伸度改善方面与非熏组无显著差异(P>0.05)。在疼痛VAS评分、中医症候、HAQ、ESR、CRP变化上两组有显著性差异(P<0.05)。患者治疗1疗程后复查血常规、肝肾功能(ALT、AST及Cr、BUN)、尿常规及心电图均无明显异常(P>0.05)。 2.实验研究：中药熏蒸能显著改善AA大鼠足跖和关节肿胀状况,增加大鼠体重,改善大鼠一般情况。中药熏蒸可明显诱导关节滑膜中HSP70的产生。而且,高浓度中药熏蒸组在增加AA大鼠体重、缓解足肿度、诱导HSP70表达均优于低浓度中药熏蒸组及水熏组(P<0.05),提示中药熏蒸疗法的药物浓度与治疗效果之间可能有一定的量效关系。 3.临床实验研究：RA患者关节滑膜中HSP70mRNA的表达量较正常关节滑膜明显增高,差异有显著性意义(P<0.01),提示HSP70mRNA在RA滑膜中有较高表达量。RA中药熏蒸组相对RA非中药熏蒸组及正常组关节滑膜HSP70有较高表达量(P<0.01)；中药熏蒸治疗后,RA患者临床ACR20、50、70、疼痛VAS评分、关节症状变化、HAQ变化等疗效指标及血清炎症指标明显改善,关节滑膜中HSP70mRNA的表达量明显增加。 结论：中药熏蒸疗法治疗类风湿关节炎临床疗效显著、安全,具有明显的抗炎消肿及镇痛作用；HSP70mRNA在中药熏蒸治疗后RA关节滑膜中表达量明显高于非中药熏蒸RA患者和外伤患者关节滑膜中表达量,推测中药熏蒸疗法的抗炎机理可能与诱导HSP70的表达有关；中药熏蒸疗法治疗类风湿关节炎的作用机理可能与诱导HSP70的产生,纠正Th1和Th2细胞因子之间的的失衡,促进由Thl细胞向Th2细胞转移,升高抗炎细胞因子IL-4、IL-10,降低促炎细胞因子TNF-α、IFN-γ有关；蒸汽的温热作用可能也是熏蒸疗法抗炎消肿的重要作用之一；中药熏蒸的药物浓度与疗效可能有一定的量效关系。