枳椇子提取物抗疲劳作用研究

疲劳是一种主观不适感觉,但客观上在同等条件下,人们失去了原来所从事的正常活动或工作能力。通常,机体受到强的外力刺激或长时间的刺激,机体细胞、组织和器官的机能或反应能力降低,如肌肉疲劳。疲劳和缺氧通常相伴产生。机体强烈运动时,必然大量消耗机体氧气,持续下去,机体不能及时供给氧,机体将处于缺氧状态。缺氧状态下,机体继续运动就会进入无氧代谢,产生大量乳酸等代谢物,改变机体微环境,产生疲劳。肌肉运动能力下降是运动性疲劳的基本标志和本质特性。本文主要研究对象是枳棋子。枳棋为鼠李科(Rhamn-aceae)拐枣属(Hovenia Thunb)植物,具有良好的保肝、利尿、降压、镇痛、中枢抑制、抗肿瘤和抗氧化等活性。本实验室前期工作中得到的枳棋子水提醇沉提取物(取干燥的枳棋子,经粉碎机粉碎,加入4倍量水回流提取,共提取3次,每次提取2 h,提取液合并过滤,滤液浓缩,1:1比例加乙醇,使含醇量达50%,冷藏48小时,过滤,取上清干燥,称重待用)已经被证实具有良好的抗疲劳和抗缺氧作用。本文主要通过一系列提取步骤得到总黄酮率更高的枳棋子乙酸乙酯提取物,并通过研究枳棋子水提醇沉提取物和枳棋子乙酸乙酯提取物在大鼠跑台模型和体外模拟疲劳的心肌细胞缺氧模型上的作用,研究它们的抗疲劳药效,并加以比较。经比较研究后,得到优化的枳棋子乙酸乙酯提取物的提取工艺-8倍水溶枳椇子水提醇沉提取物粉末并沸水浴30min,取上清液进行乙酸乙酯萃取(1:2,溶液:乙酸乙酯)3次,浓缩并干燥乙酸乙酯部分即可得到枳椇子乙酸乙酯提取物。通过检测动物体内血糖、肝糖原、肌糖原、乙酰胆碱酯酶、乳酸脱氢酶、乳酸、血尿素氮、丙二醛、超氧化物歧化酶及总抗氧化活力等指标,证实了枳棋子水提醇沉提取物和枳棋子乙酸乙酯提取物具有良好的抗疲劳效果,且后者好于前者。枳棋子提取物可能通过改善能量代谢、自由基代谢和体内酶活性等途径,抵抗疲劳。本实验还通过体外细胞学实验验证了枳棋子水提醇沉提取物和枳棋子乙酸乙酯提取物的抗疲劳作用。实验通过使细胞缺氧24小时模拟细胞疲劳状态,结果显示给药后的细胞活性更强。实验中还初步发现了槲皮素和二氢杨梅素的抗疲劳作用。通过对枳棋子水提醇沉提取物和枳棋子乙酸乙酯提取物的抗疲劳作用的比较,得知黄酮成分是枳棋子提取物抗疲劳作用的有效成分。