牡蛎多糖的分离纯化及生物学活性研究

本文以福建沿海牡蛎为原料,对牡蛎多糖提取的工艺和条件进行了系统的探讨,对纯化多糖进行结构分析和体内、体外生物活性研究。为深入研究牡蛎多糖的药用价值和牡蛎多糖产品的开发提供参考依据。 利用水提醇沉法提取牡蛎粗多糖,在单因素分析（提取时间、料液比、提取温度）的基础上进行L93～3正交分析,优化提取条件。正交试验结果显示,多糖提取的最佳工艺为:温度为90℃,料液比为1:80,时间为3 h。采用苯酚——硫酸法测得牡蛎粗多糖总糖含量为72.43 %。牡蛎粗多糖经除蛋白、透析、DEAE-52离子交换柱和Sephadex G-100凝胶层析柱,得到OPS-II和OPS-IIb两种多糖组分。紫外光谱分析（UV）显示,在260 nm和280 nm均无核酸和蛋白质吸收峰。高效液相色谱（HPLC）法检测OPS-IIb,有一个吸收峰,说明OPS-IIb为均一多糖,可对其进行组成和结构分析。OPS-IIb通过高效液相色谱（HPLC）、气相色谱（GC）、红外光谱（IR）、薄层色谱（TLC）和其他物理化学分析方法初步鉴定多糖的理化性质,结果表明OPS-IIb具有多糖的特征吸收峰而且OPS-IIb是由葡萄糖一种组分组成。体外抗氧化试验表明,牡蛎多糖具有较好的抗氧化作用,表现为:在多糖浓度为3.0 mg/mL时,对O2.-的最高清除率达43.84%;在多糖浓度为4 mg/mL时,对羟自由基的最高清除率达65.69%,对H2O2诱导的小鼠红细胞氧化溶血的抑制率可达到58.9%,抗肝组织自发性脂质过氧化作用抑制率可达到62.57%。这说明牡蛎多糖在体外可抑制自由基损伤,保护红细胞膜的结构和功能,是一种较好的羟自由基和超氧阴离子的清除剂。小鼠免疫功能试验结果表明,牡蛎3mg/ml组能有效增加正常小鼠脾淋细胞巴和碳廓清活力,而6mg/ml、9mg/ml组无明显作用。