1，5-二咖啡酰奎宁酸临床药代动力学研究

1,5-二咖啡酰奎宁酸是从中药旋覆花中分离提取的单体化合物,具有广泛的生物学活性,包括抗氧化、抗菌、抗组胺、抗肝纤维化等,但受到关注主要是因为其具有抗人体免疫缺陷病毒活性。本论文旨在对1,5-二咖啡酰奎宁酸进行临床药代动力学研究及代谢产物研究,从而为今后的临床研究提供依据,确保临床用药的有效性和安全性。 生物样品中同时测定1,5-二咖啡酰奎宁酸及其活性代谢产物分析方法的建立和确证 建立和确证人血浆中同时测定1,5-二咖啡酰奎宁酸(1,5-Dicaffeoylquinic Acid, 1,5-DCQA)及其两个活性代谢产物1-咖啡酰-5-阿魏酰奎宁酸(1-Caffeoyl-5-feruoylquinic acid,1,5-CFQA)和1,5-二阿魏酰奎宁酸(1,5-O-Diferuoylquinic acid,1,5-DFQA)的LC-MS/MS方法。血浆样品经乙酸乙酯萃取后,以乙腈-水(5 mmol乙酸铵,PH 3.5)为流动相,用CAPCELL C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,5μm)分离,采用电喷雾电离源(ESI)选择性离子监测模式(SRM)。Ⅰ期临床分析方法中三个待测物的线性范围都为1-200 ng·mL-1,Ⅱ期临床分析方法中1,5-DCQA的线性范围为0.5-200 ng·mL-1,两个代谢产物的定量范围是1-200 ng·mL-1,各待测物精密度、准确度都符合生物分析方法的要求,方法无稀释效应和基质抑制效应。 1,5-二咖啡酰奎宁酸Ⅰ期临床药物动力学研究 健康受试者单次口服1,5-DCQA(200、400和800 mg／人)后不同时间点取血,测定血药浓度计算药动学参数。结果表明在所给剂量范围内1,5-DCQA及其双甲基代谢产物1,5-DFQA的AUC(0-t)和Cmax近似与剂量成比例递增,显示1,5-DCQA和1,5-DFQA在人体内呈线性动力学。连续口服给药后,1,5-DCQA首次给药与末次给药相比,AUC(0-t)、Cmax和t1/2差异没有统计学意义；说明连续给药后在人体内不存在依赖时间的蓄积和诱导加速或诱导抑制代谢现象。其双甲基代谢产物1,5-DFQA首次给药与末次给药相比,AUC(0-t)差异有统计学意义,末次给药后的AUC(0-t)比首次给药后的AUC(0-t)显著增加；说明连续给药后在人体内存在依赖时间的蓄积。 1,5-二咖啡酰奎宁酸Ⅱ期临床药物动力学研究 病人受试者每天2次连续14天(200 mg/次,300 mg/次)口服1,5-DCQA后,1,5-DCQA首次给药与末次给药相比,AUC(0-t)和t1/2差异没有统计学意义；说明连续给药后在人体内不存在依赖时间的蓄积或和诱导加速或诱导抑制代谢现象,不会改变体内的代谢处置过程。其双甲基代谢产物1,5-DFQA首次给药与末次给药相比,AUC(0-t)差异有统计学意义,末次给药后的AUC(0-t)比首次给药后的AUC(0-t)显著增加；说明连续给药后在人体内存在依赖时间的蓄积。 1,5-二咖啡酰奎宁酸在人体内的代谢产物研究 采用液相色谱-电喷雾离子阱质谱(LC-ESI／MSn)联用技术,对口服1,5-DCQA后,人尿中的代谢产物进行了研究,在人尿中共发现了28个1,5-DCQA的甲基化、葡萄糖醛酸化及甲基-葡萄糖醛酸化代谢产物,其中有2个代谢产物的结构经与合成的标准品对照得到确证。检测结果显示出：甲基化、葡萄糖醛酸化和异构化反应是1,5-DCQA在人体内的3种重要代谢途径。