不同桂花品种群组织培养的研究

本研究以不同桂花品种群的茎尖为外植体,探讨了不同基本培养基和不同生长调节物质等因素在各品种群茎尖萌发、增殖以及诱导生根过程中的作用,其目的是筛选出适合各品种群在不同组织培养阶段的最佳培养基配方。实验同时以丹桂及金桂试管苗叶片为外植体,对这两种桂花的愈伤组织进行诱导、增殖培养研究。试验设计采用单因素随机区组设计、正交设计及均匀设计。实验结果如下: 1.金桂、银桂、丹桂萌发芽以0.1%升汞为消毒试剂,合适消毒时间范围为3～7min,5min最佳。外植体以茎尖为好,与茎段相比,消毒易于把握且成活率高。 2.金桂茎尖培养的最佳培养基为B5+6-BA2mg/L+NAA0.12mg/L,萌发率可达86.1%;银桂茎尖培养的最佳培养基为:B5+B-BA2mg/L+NAA0.02mg/L,萌发率可达85%;丹桂茎尖培养的最佳培养基为:B5或LMC+6-BA7mg/L,平均株分化率可达1.73。品种群之间的萌芽率优势差异表现为金桂≥银桂＞丹桂＞四季桂。金桂和银桂茎尖初代培养表现相似;丹桂茎尖培养愈伤现象较严重;四季桂茎尖初代培养几乎失败。 3.增殖培养的最佳培养基组合在各品种群间存在差异。金桂增殖培养的最佳培养基为B5+6-BA5.0mg/L+NAA0.04mg/L,增殖倍数达2.5;银桂增殖培养的最佳培养基为B5+6-BA7.0mg/L+NAA0～0.05mg/L,增殖倍数达2.2;丹桂增殖培养的最佳培养基为B5+6-BA8.0mg/L,增殖倍数达2.8。高浓度的NAA影响三种桂花的增殖。 4.丹桂生根的最佳培养基为:1/285+6-BA0.05mg/L+NAA1.5mg/L或1/2BS+B-BA0.1mg/L+NAA1.5mg/L,该组合可以获得一个较好的生根质量:生根率达100%,平均根长达0.5cm,平均根数达2.38。 IBA不是进行丹桂生根有效的生长素。 5.炼苗移栽以蛭石+草炭(1∶1)为好,移栽成活率可达80%以上。 6.以丹桂和金桂试管苗的叶片为材料,进行愈伤组织的诱导。丹桂愈伤组织诱导的最佳培养基为:B5+6-BA0.6mg/L+2,4-D0.6mg/L+蔗糖30g/L+琼脂5g/L;金桂愈伤组织诱导的最佳培养基为:B5+B-BA1.0mg/L+2,4-D0.6mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L,桂花试管苗叶片的愈伤组织须在B5培养基及添加一定量的6-BA的培养基上才能成功诱导;两种桂花的愈伤组织在最佳诱导培养基中均可很好地增殖。