簇生沿丝伞化学成分及其抗肿瘤活性的研究

本论文对簇生沿丝伞（Naematoloma fasciculare）的化学成分进行了系统的研究，并应用抗肿瘤体外及体内实验对分离得到的各个组分和各个单体成分进行了抗肿瘤活性的研究。 簇生沿丝伞子实体干燥后，甲醇60℃热提取3次，提取液浓缩后加水成混悬液，依次用石油醚和乙酸乙酯萃取，水层蒸干后溶于甲醇，不溶部分再次溶于水，即将初提物分为石油醚层、乙酸乙酯层、甲醇层和水层四个组分。石油醚层上硅胶柱，用正己烷：乙酸乙酯（6：5）溶剂系统洗脱，得化合物1和化合物4。乙酸乙酯层浓缩后低温放置24小时，析出白色沉淀。沉淀经甲醇和乙醚反复纯化得化合物2。溶液部分上硅胶柱，用正己烷：乙酸乙酯（6：5）溶剂系统洗脱，得到16个部分，部分3中得到化合物4。部分4再次上硅胶柱，用乙酸乙酯（100％）洗脱，得化合物3。甲醇层浓缩至小体积放入冰箱静置，析出结晶，经水和乙醇反复重结晶得化合物5。化合物1-5经过理化检识、HPLC分析、核磁共振和质谱等色谱检测分别鉴定为麦角甾醇过氧化物、fasciculol C、啤酒甾醇、麦角甾醇和甘露醇。 采用传统的多糖提取方法（水提醇沉），对簇生沿丝伞子实体的粗多糖进行提取，然后进行去蛋白。结果表明，多糖成分的含量较高，得率可达3.6％。 对簇生沿丝伞的石油醚层进行GC-MS分析，分离并分别鉴定为十八碳二烯酸和十六碳酸等20个化合物。其中多数为饱和烷烃，还含有少量的不饱和脂肪酸和脂肪酸酯。 应用MTT法，检测簇生沿丝伞的石油醚层、乙酸乙酯层、甲醇层、水层、粗多糖和单体化合物fasciculol C对MCF-7细胞增殖的抑制作用。结果表明，石油醚层可显著抑制MCF-7的细胞增殖，且存在量效关系，药物浓度为2mg／mL时，抑制率达60％。其次，fasciculol C对MCF-7细胞增殖也具有抑制作用，且存在量效关系，抑制率达35.4％。而且，这两个组分与对照组对比，都具有非常显著的差异性（p＜0.01）。然而，乙酸乙酯层、甲醇层、水层和粗多糖成分对MCF-7细胞增殖的抑制作用不明显，但高剂量组与对照组对比同样具有显著性差异（p＜0.01或p＜0.05），说明都对细胞的生长存在不同程度的影响。 选用H22荷瘤小鼠，对簇生沿丝伞的石油醚层、乙酸乙酯层、甲醇层、水层、粗多糖和各个单体化合物进行抗肿瘤体内实验。结果表明，石油醚层和甲醇层对H22荷瘤鼠具有明显的抑瘤作用。石油醚层（430mg／kg）抑瘤率可达64.42％，且具有一定