基于标准汤剂指纹图谱评价的肝脂消颗粒剂药学研究

肝脂消颗粒是由绵茵陈、山楂、黄精、灵芝、丹参、法半夏等10味中药组成的复方制剂,具有降脂、护肝的功效,主要用于治疗脂肪肝,在临床已使用多年,经数千例患者使用,药效得到充分肯定。本论文在对文献资料研究的基础上,根据各药味中所含有效成分和标准汤剂指纹图谱研究的情况,参考相同药物在其他中成药制剂中的提取工艺,分别提取各味药物的有效成分,并对各部分药物提取的最佳工艺条件进行优化,从而确定科学合理的提取、制备工艺。采用TLC和HPLC等现代分析技术,建立了制剂的质量标准考察方法,拟定了制剂的质量标准,为今后的新药研究提供实验依据。 在提取工艺方面,考察了各药味采用不同提取方法对标准汤剂指纹图谱的影响,从而确定了醇提与水提两部分,并分别采用L9(34)正交试验优选肝脂消颗粒的提取工艺。结果优选的最佳醇提工艺为：丹参、灵芝、决明子加8倍量70%乙醇,加热回流提取3次,每次1.5h；得到醇提液的指纹图谱色谱峰,基本都是标准汤剂的特征峰。最佳水提工艺为：滤渣与其余绵茵陈等七味加8倍量水加热回流提取两次,每次1.5h；得到水提液的指纹图谱与标准汤剂指纹图谱相似。 在浓缩、干燥工艺方面,分别考察不同浓缩温度对醇提液与水提液指标成分的含量和指纹图谱的影响。结果醇提液在60℃下浓缩,含量与浓缩前相比保留率较高,且指纹图谱浓缩前后基本一致；水提液在在80℃下浓缩,含量与浓缩前相比保留率较高,且指纹图谱浓缩前后基本一致。采用了减压干燥与微波干燥两种方式对指标成分的含量和指纹图谱的影响,结果采用微波干燥成分保留率较高,且指纹图谱与标准汤剂相似。 在成型工艺方面,考察了辅料的种类和用量、润湿剂的种类,并对成品的休止角、水分、溶解性、临界相对湿度进行测定,并对成品指标成分的含量和指纹图谱进行测定。结果优选的辅料为：可溶性淀粉：微晶纤维素=2：3；用90%乙醇作润湿剂；测得休止角为24.78°；水分、溶解性、临界相对湿度符合规定；指标成分的含量为；指纹图谱与标准煎剂相似。 在质量标准方面,采用薄层层析法(TLC),对制剂中的绵茵陈、灵芝2味药材进行了薄层鉴别,斑点清晰,专属性强；采用HPLC法对制剂中君药绵茵陈、山楂中所含绿原酸、臣药丹参中的丹酚酸B为指标,测定样品中绿原酸和丹酚酸B的含量,以甲醇-0.05%磷酸溶液(梯度洗脱)为流动相；柱温：30℃；检测波长：丹酚酸B为286nm、绿原酸为327nm；流速：1.0mL.min-1:进样量：10μL。结果绿原酸的线性回归方程为Y=3433582.99X-3105.54,r=0.9999,表明：绿原酸在0.0226～0.4520μg范围内进样量与峰面积有良好的线性关系,平均加样回收率为97.5%,RSD为2.5%。丹酚酸B的线性回归方程为Y=930920.90X-12208.93,r=0.9999,表明：丹酚酸B在0.0943～1.8857μg范围内进样量与峰面积有良好的线性关系,平均加样回收率为97.0%,RSD为1.5%。建立了制剂中绿原酸、丹酚酸B的含量测定方法,测定了3批样品中绿原酸、丹酚酸B的含量范围,每袋(10g)绿原酸、丹酚酸B的含量分别在10.48～10.60mg.94.92～96.68mg之间。建立了肝脂消颗粒HPLC指纹图谱分析方法,采用RP-HPLC法,色谱柱为Phenomenex Synergi 4μm Hydro-RP 80A；流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液(梯度洗脱)；检测波长为280nm；流速1.0mL/min:柱温为30℃。结果肝脂消颗粒共标出17个共有峰。 研究结果表明：该制剂制备工艺合理可行,质量标准可控。