二氢杨梅素铵盐对小鼠急性酒精性胃黏膜损伤的保护作用

目的:研究二氢杨梅素水溶性衍生物二氢杨梅素铵盐在小鼠急性酒精性胃黏膜损伤中的作用。方法:将35只C57BL/6J小鼠(SPF级6-8周龄18-22g)随机分为5组:正常组、模型组、二氢杨梅素组(5mg/kg)、二氢杨梅素铵盐组(5mg/kg,低TDHM组)、二氢杨梅素铵盐组(10mg/kg,高TDHM组),每组7只。适应性喂养一周后,所有小鼠禁食不禁水24h,正常组、模型组给予生理盐水(10mL/kg)灌胃,其余三组给予对应药物灌胃(10mL/kg);30min后正常组给予生理盐水(12.5ml/Kg)灌胃,余小鼠给予56°白酒(12.5ml/kg)灌胃。观察小鼠一般状态,6h后乙醚麻醉后脱颈处死小鼠,分离取出胃组织,沿胃大弯剪开胃腔,冰生理盐水清洗干净,平展于干净平板上,观察大体改变,计算损伤指数及溃疡抑制率。制作胃组织匀浆,ELISA法检测IL-6、TNF-α、IL-10,WST-1法检测SOD、TBA法检测MDA、比色法检测MPO水平并进行统计分析。结果:1小鼠一般状态:正常组小鼠精神状态最佳,活动正常,好动,喜攀爬;模型组小鼠酒精灌胃后出现步态不稳,活动减少、闭眼不动、嗜睡等症状;给予二氢杨梅素及二氢杨梅素铵盐处理的小鼠相比模型组的症状程度轻,但不如正常组小鼠活跃。2胃大体情况:正常组胃结构完整,模型组损伤最明显,可见出血、糜烂,各药物预防组出血、糜烂程度较模型组轻。3损伤指数及溃疡抑制率:与模型组(38.33±8.05)相比,低TDHM组(29.83±7.10)、高TDHM组(25.16±6.54)及DHM组(26.16±6.14)均可明显降低胃组织损伤指数(P均﹤0.05,抑制溃疡形成;溃疡抑制率分别为:22.17%、34.3%、33.05%);但三个药物组损伤指数在统计学上无明显差异。4胃组织中IL-6、TNF-α、IL-10水平变化:与正常组(24.97±9.50ng/g)比较,模型组(42.21±6.16ng/g)IL-6水平明显升高(P﹤0.01),DHM组、低TDHM组IL-6水平下降不明显(41.03±7.44ng/g,32.14±10.23ng/g,VS模型组,P>0.05,P>0.05),高TDHM组IL-6水平显著下降(28.79±4.90ng/g VS模型组,P﹤0.05)。与正常组(214.03±41.41ng/g)比较,模型组(300.09±22.65 ng/g)TNF-α水平明显升高(P﹤0.01),DHM组TNF-α下降不明显(270.19±32.99 ng/g VS模型组,P>0.05),低TDHM、高TDHM均能显著降低TNF-α的水平(224.02±17.47 ng/g,224.56±32.12 ng/g VS模型组,P﹤0.05,P﹤0.05)。与正常组(212.25±75.71 ng/g)比较,模型组(212.06±46.75ng/g)IL-10水平无明显变化,DHM灌胃后IL-10水平有所上升,但无统计学差异(235.34±21.55 ng/g VS模型组,P>0.05),低TDHM、高TDHM灌胃后IL-10均显著上升(339.35±40.98 ng/g,348.89±80.45 ng/g,VS模型组,P均﹤0.01)。5胃组织中SOD活性水平变化:与正常组(1.92±0.56 U/mgprot)比较,模型组(3.61±0.62 U/mgprot)SOD水平上升,但无统计学差异(P>0.05),DHM灌胃后SOD活性水平有所上升,但无统计学差异(4.50±2.71 U/mgprot VS模型组,P>0.05),低TDHM、高TDHM灌胃后SOD活性均显著上升(6.73±2.37U/mgprot,6.60±2.41 U/mgprot,VS模型组,P﹤0.05,P﹤0.05)。6胃组织中MDA水平变化:与正常组(10.28±4.23nmol/mgprot)比较,模型组(23.75±5.66 nmol/mgprot)MDA水平显著升高(P﹤0.01),DHM组MDA水平有所下降,但无统计学差异(21.66±6.96 nmol/mgprot,P>0.05),低TDHM、高TDHM灌胃后MDA均显著下降(13.07±5.40 nmol/mgprot,10.58±4.60nmol/mgprot VS模型组,P﹤0.05,P﹤0.01)。7胃组织中MPO活性水平变化:与正常组(5.86±3.68U/g)比较,模型组(14.66±3.73 U/g)MPO水平显著升高(P﹤0.01),DHM灌胃后MPO水平无显著下降(9.68±4.71 U/g VS模型组,P>0.05),低TDHM、高TDHM灌胃后MPO均明显下降(8.12±4.69 U/g,7.01±5.11 U/g VS模型组,P均﹤0.05)。结论:1二氢杨梅素铵盐具有减轻急性酒精引起的胃黏膜损伤的作用,可能与减轻酒精引起的胃组织炎症及氧化应激损伤有关。2二氢杨梅素铵盐两种剂量(5mg/kg与10mg/kg)保护急性酒精胃黏膜损伤作用无明显差异,但抗炎、抗氧化作用均强于二氢杨梅素。