电喷雾质谱（ESI-MS）是当今最软的电离质谱之一,是研究各种生物大分子及其非共价键复合物的理想工具。本论文用ESI-MS详细地研究了AZT-5’氢亚磷酸酯（AZTPH）、d4T-5’氢亚磷酸酯（d4TPH）和AZT-5’磷酰氨基酸酯（CAZT-AAOMe）三类抗HIV前药与常见蛋白——牛胰岛素、溶菌酶以及细胞色素C之间的弱相互作用,发现磷酰化的AZT和d4T与蛋白形成的非共价键复合物可以高灵敏度检出,而未磷酰化的AZT和d4T与蛋白的非共价键复合物却检测不到,ESI-MS的实验表明磷酰基的存在增强了AZT和d4T与蛋白的弱相互作用;通过两种不同磷酰化的AZT和d4T前药（如CAZTPH与IAZTPH、CAZTPH与Id4TPH、CAZTPH与Cd4TPH、Id4TPH与d4TVal等）与蛋白形成非共价键复合物能力的进一步比较研究发现:CAZTPH与蛋白结合形成复合物的能力最强,Id4TPH与蛋白结合形成复合物的能力次之,d4TVal与蛋白结合形成复合物的能力最弱。值得一提的是:抗HIV活性比较高的磷酰化的AZT和d4T前药与蛋白形成的复合物在ESI-MS中就更易检出;利用CD和蛋白荧光猝灭方法对前药和蛋白的溶液进行检测,观测到了由于前药引起的蛋白CD图的改变以及蛋白荧光猝灭的现象,证明了非共价键复合物同样存在于溶液中;在磷酰化的AZT和d4T前药与20种常见氨基酸分组相互竞争实验中,发现了前药最容易与芳基类氨基酸形成复合物,这一结果对于了解和确定前药与蛋白的结合位点具有重要的启示作用。
深入研究了AZT-5’磷酰化氨基酸酯类的电喷雾质谱,归纳和总结了AZT-5’磷酰氨基酸酯类的[M+H]+、[M+Na]+、[M+K]+和[M—H]-的裂解规律,发现在金属离子的静电引力和空间作用的帮助下,甲氧基迁移的新颖重排反应,并用高分辨质谱、多级质谱、取代实验以及计算等多种方法和手段证实了其重排机理;在正负离子模式下d4T-5’氢亚磷酸酯类化合物电喷雾质谱的研究中,又发
