毛菊苣中秦皮甲素和秦皮乙素的药代动力学及生物转化研究

目的：1.采用UPLC法同时测定大鼠血浆中秦皮甲素与秦皮乙素的浓度,并研究其在大鼠血浆中的药动学行为。2.建立测定大鼠尿中秦皮甲素与秦皮乙素含量的方法并研究其在大鼠尿中的药动学行为。3.秦皮甲素和秦皮乙素在大鼠体内代谢转化研究。方法：1.采用Hypersil BDS C18柱,流动相为甲醇-0.2%甲酸(12：88),流速为1.2m1·min-1,柱温为35℃,检测波长为339nm。以替硝唑为内标,甲醇-乙腈(2：3)沉淀蛋白后,测定大鼠血浆中秦皮甲素与秦皮乙素的含量并计算药动学参数。2.尿样加入替硝唑内标,经固相萃取后HPLC分析,采用Shim-pack VP-ODS柱(250mm×4.6mm,5μm)流动相为甲醇-0.2%甲酸(13：87),流速为1.0m1·min-1,柱温为35℃,检测波长为339nm,测定大鼠尿样中秦皮甲素与秦皮乙素的含量并计算药动学参数。3.采用电喷雾离子化(ESI)方式,检测离子为正离子,在全离子扫描(SCAN)状态下,传输电压为3.0KV,源内碰撞气能量20eV,碰撞气流量0.16ml·min-1,脱溶剂温度350℃,离子源温度450℃,大鼠给药后尿样经固相萃取后HPLC-MSn分析,推测秦皮甲素和秦皮乙素在大鼠体内的代谢产物及代谢途径。结果：1.大鼠灌胃秦皮甲素与秦皮乙素后,秦皮甲素吸收后的药代动力学符合一级吸收二室模型,权重为1/C2,秦皮乙素吸收后的药代动力学符合一级吸收二室模型,权重为1/C。秦皮甲素、秦皮乙素口服后吸收快,迅速达到峰浓度,两药体内消除快,体内滞留时间秦皮甲素为1.2803h、秦皮乙素为3.3969h。2.秦皮甲素和秦皮乙素灌胃给予大鼠后检测不同时间段的累积尿药量。经计算,秦皮乙素48h累积尿药排泄量大于秦皮甲素,结合血药数据说明秦皮乙素吸收大于秦皮甲素,少部分原形药物从肾消除,秦皮乙素肾清除药量小于秦皮甲素,从肾清除原形药物的量可知大部分药物以代谢物的形式排出体外。尿药数据通过处理可见秦皮甲素原型药物的尿药总排泄量0.578%,k=0.0631h-1,h/2=10.983h；秦皮乙素原型药物的尿药总排泄量0.355%,k=0.0640h-1,t1/2=10.8281h。3.大鼠口服秦皮甲素和秦皮乙素后尿液中发现了5个代谢产物,其代谢途径主要为水解、还原、硫酸化。结论：本研究在前期秦皮甲素和秦皮乙素药理基础上,对秦皮甲素、秦皮乙素两种成分在大鼠体内药代动力学及其体内生物转化进行研究,发现二者在大鼠体内血药浓度和生物利用度较低,代谢研究亦发现其生物转化率高,并采用液质联用的方法推测了其在大鼠尿液中的代谢产物,本研究为阐明毛菊苣保肝作用物质基础和作用机制提供参数。