伴2型糖尿病的慢性牙周炎牙周可疑致病菌的检测

目的 检测伴2型糖尿病的慢性牙周炎患者龈下菌斑微生物的种类和数量,分析2型糖尿病患者牙周状况和全身因素对其龈下菌群的影响。从微生物学的角度探讨2型糖尿病与慢性牙周炎的相互作用机制。 材料与方法 1、研究对象 伴2型糖尿病的慢性牙周炎患者154例为实验组（DM组）,选取年龄、性别、牙周状况与之相匹配的非糖尿病的单纯慢性牙周炎患者120例为对照一组（CP组）,牙周健康且全身健康者40例为对照二组（N组）。所有患者均满足:无全身其他系统性疾病,妇女非妊娠期,未服用避孕药;近半年内未做过牙周治疗;3个月内未服用过抗生素;无明显咬合关系异常;签署知情同意书。 2、牙周临床指标检查 检查并记录6颗指数牙16、11、26、36、41、46的探诊深度、龈沟出血指数、附着丧失、牙石指数、软垢指数、松动度。 3、样本采集 收集受检者的6颗指数牙的颊侧龈下混合菌斑置于1ml PBS缓冲液的EP管中,-80℃保存。 4、致病菌的检测 酚氯仿法提取菌斑DNA,应用以16S rRNA为基础的聚合酶链反应（PCR）技术检测菌斑中牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis,Pg）,放线共生放线杆菌（Aggregatibacter actinomycetemcomitans,Aa）,具核梭杆菌（Fusobactrriumnocleatum,Fn）,福塞坦氏菌（Tannerella forsythia,Tf）,中间型普里沃氏菌（Prevotella intermedia,Pi）,齿垢密螺旋体（Treponema denticola,Td）的阳性率;1.5%琼脂糖凝胶电泳检测结果,运用电泳凝胶成像分析软件（Fluorchem V2.0）分析各电泳条带的平均灰度值（AVG）,计算细菌的相对含量。 5、统计学分析 数据采用SPSS11.5软件进行分析,资料采用独立样本及配对t检验,x2检验,方差分析,pearson二元相关分析、logistic回归等进行统计学分析。显著水平:P＜0.05时有显著性差异,P＜0.01时有高度显著性差异。 结果 1、Pg、Aa、Fn、Pi、Tf、Td在伴2型糖尿病的慢性牙周炎患者中均可检出;与CP组相比,在性别、年龄、牙周状况一致的情况下,轻度牙周炎者,DM组Pi的检出率显著低于CP组,P＜0.05;重度牙周炎者,DM组Pg、Aa、Tf的检出率显著高于CP组,P＜0.05。 2、DM组Aa、Tf的相对含量显著高于CP组;Pi的相对含量显著低于CP组。 3、Tf阳性患者的TC水平明显高于阴性患者（P=0.002）;Aa阳性检出者的空腹血糖水平明显高于阴性患者（P=0.036）;空腹血糖水平与Tf的相对含量显著正相关,空腹血糖、血浆总胆固醇（TC）水平与Pi的相对含量呈显著负相关。 结论 1、与单纯牙周炎相比,伴发2型糖尿病的牙周炎其牙周可疑致病菌的种类和数量均发生了改变,Tf、Aa在伴发2型糖尿病的牙周炎中更具优势,可能与糖尿病关系更为密切。 2、2型糖尿病可能影响某些牙周可疑致病菌如Pi等在牙周袋内的定值。 3、不同种类的细菌对糖尿病的影响不同,龈下菌群中某些致病菌如Aa、Tf的量达到一定程度后可能是2型糖尿病发生的一个重要潜在因素。