钩吻素子体外抑制人结肠腺癌细胞生长并诱导其凋亡及其机制的探讨

钩吻（Gelsemium elegans benth，GEB）为马钱科胡蔓藤属植物，是 世界闻名的剧毒植物，主要含有多种吲哚类生物碱。钩吻素子 （Koumine，Kou）是从钩吻中分离的一种生物碱单体，分子式 C2oH22N2o，分子量306.8，为白色结晶，难溶于水，其为钩吻的主要成 分，约占总碱的30％。以往报导钩吻植物及其提取物具有抗肿瘤作用、 抗炎镇痛及免疫促进作用、乙酰胆碱样作用等。 本课题利用形态学、细胞生物学、分子生物学等方法并结合流式细 胞术，研究了Kou体外对人结肠腺癌Lovo细胞的生长及凋亡的影响，并 利用粘附细胞术对其生理学机制进行初步探讨，主要结果如下： 1、钩吻素子（Kou）体外可抑制Lovo细胞的生长，并呈剂量依赖及 时间依赖性。 2、Kou体外可诱导Lovo细胞凋亡。 3、Kou能降低Lovo细胞跨膜电位（MP）。 4、Kou能降低Lovo细胞线粒体跨膜电位（ψm）。 5、Kou能降低细胞内游离Ca2+浓度[Ca2+]i，加入EDTA后可使 [Ca2+]i升高。 6、Kou能增高Lovo细胞的活性氧（ROS）。 7、Kou对Lovo细胞的细胞内pH值（pHi）无明显影响。 8、Kou能升高Lovo细胞的细胞间通讯（GJIC）功能。 9、Kou能降低Lovo细胞的膜脂流动性。 总之，Kou体外具有对Lovo细胞的生长抑制和诱导凋亡作用。 Kou诱导Lovo细胞凋亡的部分机制可能是通过作用于某种膜离子通 道、载体蛋白或离子泵，使其电耦联障碍，进而影响其信号转导过程；并 降低细胞的膜脂流动性，影响其代谢耦联；同时上调细胞的GJIC功能， 从而使这一效应迅速在细胞间传播得以实现。