再生障碍性贫血动物模型的建立及安迪对其治疗作用的实验研究

再生障碍性贫血（Aplastic Anemia，AA）简称再障，是一组造血 组织功能衰竭综合症，是临床常见疑难病之一。目前，尚无特别有效 的治疗方法，但临床治疗原则主要有以下两条：一是输血疗法；二是 中西药联合治疗。前者疗效肯定，但在实践中由于血源因素而应用受 限；后者则不同，药物特别是中药治疗AA的研究已取得明显进展。 本实验目的旨在建立与人类疾病的发病机理、临床特征相似，成功率 高，稳定性好，简便易行的AA动物模型；同时，探讨中药安迪对其 治疗作用，为临床治疗提供实验依据。 一、AA动物模型的建立 方法：参考文献中制模方法及临床常见病例的发病原因，通过正 交试验法确定各因素和各水平的最佳组合，最终选取给予小鼠3.0Gy 60Co-γ射线照射后第4d、5d、6d时ip环磷酰胺50mg·kg-1、氯霉素 62.5mg·kg-1，获得AA的小鼠模型。对此模型的进一步研究，包括外 周血象和形态学的检查表明：①模型小鼠的外周血象在第7d时（红 细胞在第11d时为最低）达到最低值（p＜0.01），此后有一定程度的 回升，然后维持在一定的水平，27d时各系细胞仍与正常对照组有显 著差异（p＜0.01），35d时基本恢复至正常水平；②骨髓活检示模型 第四军医大学硕士学位论文 小鼠在第11d时造血细胞最少（造血细胞容量＜20％），几乎完全被脂 肪细胞代替，并有间质水肿，血窦扩张，无巨核细胞等改变，此后造 血细胞逐渐增多，至第35d时造血细胞大约占细胞容量的50％；③病 理切片示模型小鼠在第 7d时即见脾被膜不完整，红白髓分界不清， 脾索萎缩，免疫母细胞增生明显，脾窦大量充血，部分组织坏死，无 脾小节；在第 27d时可见大量脾小节和增生的淋巴细胞，充血减轻， 红白髓分界清楚；④模型小鼠脾脏超微结构第7d时显示淋巴细胞减 少，坏死增多，血窦扩张，内皮细胞损伤，核染色加深，染色质浓缩， 核膜不清等，此后与病理切片平行好转，第27d时淋巴细胞增多，部 分细胞有分裂迹象。结论：本模型操作简便，易于实施，重复性好， 模型稳定，发生机理与临床类似，并可持续30余天，更方便作为筛 选治疗AA有效药物的动物模型。 二、安迪对小鼠AA的治疗作用研究 通过对小鼠外周血象和骨髓活检以及脾脏的病理和电镜观察，确 立了安迪对小鼠AA的量效关系并对其作用机理进行了初步探讨。结 果：①安迪对模型小鼠 AA有确实的疗效，可升高其外周血象…＜ 0刀1L 骨髓增生程度得到恢复，造血细胞增加明显造血细胞容量＞ 40％X并使萎缩的脾脏基本恢复正常。②安迪大、中剂量组小鼠的外 周血象基本恢复正常，在此剂量范围内，小鼠内脏病理切片未见损害。 ③给予安迪后，模型小鼠的脾脏和胸腺重量显著增加中＜0刀1)，脾 脏的病理切片和超微结构均明显改善。 结论：①小鼠 6吐O－Y射线照射后…环磷酚胺和氯霉素，可以获 得与人类疾病的病因、性质、特征相似的的小鼠AA模型，其方法简 便可靠，结果稳定，成功率高，适用于AA药物的疗效评价。②安迪 对小鼠 AA具有明确疗效，其有效剂量在 15～30 mg·kg”l，在此剂量 时未见毒副作用，且效果优于康力龙。＠安迪治疗 AA的作用机理可 4 第四军医大学硕士学位论文 能与促进骨髓造血干细胞的增殖和调节机体免疫功能两方面有关。