18β-甘草次酸对变应性鼻炎大鼠鼻黏膜上皮细胞紧密连接及正常大鼠血糖、血脂的影响

五环三萜化合物甘草次酸属萜类化合物,提取自豆科植物甘草,甘草是一味重要的传统中药,《伤寒论》的110个处方中有74个处方有甘草,为临床广泛应用。近年来随着药理学,实验方法的发展、完善,发现甘草还具有明显的抗炎、抗溃疡作用和抗变态反应。目前大量研究认为甘草作用主要归因于甘草的主要成分根和茎中一种有效活性成分甘草甜素和其在机体内的最终代谢有效物质甘草次酸及其衍生物。因此,对甘草及其主要成分的研究引起学者的研究热忱,对其有效成分进行深入研究以寻找高效低毒的新药品种将具有重大的药学价值和实践意义。变应性鼻炎(Allergic Rhinitis AR)是IgE介导的Ⅰ型变态反应,是耳鼻咽喉头颈部外科常见病、多发病。近年来,随着工业化程度的提高、现代化生活方式的改变和人类生态环境的急剧恶化,AR发病率呈现持续上升趋势,严重影响了患者的生活质量,已经成为影响人类健康的全球性问题。紧密连接广泛存在于脊椎动物体内各种内皮细胞与上皮细胞之间,起到封闭细胞间隙的作用。TJs位于细胞顶端,呈箍状围绕在细胞的周围,调节细胞的增殖、极化以及细胞间的物质扩散。不同的上皮组织由于其生理作用不同,细胞间紧密连接的构成及特性也各不相同,近年来的研究发现,紧密连接参与呼吸道上皮细胞的分泌(Coyne等.2002)、肠上皮细胞的屏障功能(Irvine等.2000)以及肾小管上皮的重吸收(Lee等.2011)等过程。透射电镜是观察紧密连接的有效手段。本实验通过研究长期口服甘草次酸对大鼠血脂的影响,同时建立大鼠变应性鼻炎模型,分别给予甘草次酸低中高剂量,及氯雷他定干预,研究变应性鼻炎发病过程中甘草次酸对鼻黏膜上皮细胞紧密连接的影响,为甘草次酸和变应性鼻炎临床提供一定的实验依据。 第一部分18β-甘草次酸对变应性鼻炎大鼠鼻黏膜上皮细胞紧密连接的影响 目的：观察18p-甘草次酸(glycyrrhetinic acid, GA)对变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)大鼠鼻黏膜上皮细胞紧密连接(tight j unctions, TJs)超微结构的影响。 材料与方法：96只Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、氯雷他定组、甘草次酸组,每组24只。卵清蛋白致敏建立大鼠AR模型,观察和比较给药干预后第2、4、6、10周,各组行为改变及透射电镜下鼻黏膜上皮细胞TJs形态。 结果：AR模型TJs长度变短,质膜电子高密度影变厚、融合点数量减少,间隙增宽甚至断裂。在变应原持续作用下,模型组鼻黏膜上皮细胞的TJs的上述改变呈进行性加重,而甘草次酸干预组TJs变短、质膜影变厚、膜融合点减少均较模型组缓解,并随观察周期延长基本接近对照组。 结论：18p-甘草次酸可缓解AR大鼠鼻腔黏膜上皮细胞间紧密连接的损害。 第二部分长期口服18β-甘草次酸对大鼠血糖、血脂的影响 目的：探讨长期口服不同剂量的18β-甘草次酸(glycyrrhetinic acid, GA)对大鼠血糖及血脂中甘油三酯、总胆固醇的影响。 材料与方法：20只Wistar大鼠随机分成空白组30只,低(25mg/Kg)、中(50mg/Kg)、高(100mg/Kg)剂量甘草次酸组各30只,于18β-甘草次酸灌胃后第6、14、22、30周及30周后停药4周心脏采血,分别测其血糖、甘油三酯、总胆固醇的含量。 结果：18β-甘草次酸灌胃后第6周、第14周、第22周、第30周及30周后停药4周后低、中、高剂量组的大鼠血糖与空白组比较有下降的趋势,但无显著差异(p>0.05)。甘油三酯、总胆固醇于18β甘草次酸灌胃后第6周、14周、22周、30周及30周停药4周后,与空白组比较,低、中、高剂量组无显著差异(p>0.05)。 结论：长期口服不同剂量的18β-甘草次酸有降低大鼠的血糖的趋势,但无统计学意义,而对大鼠的甘油三酯和总胆固醇无明显影响。