研究背景:人的免疫系统可以保护人类避免受到来自外界的具有潜在性的微生物感染,但是当人类的免疫系统出现自身耐受的问题时,之后便会引起自身免疫反应,而这些免疫反应便是某些疾病的基础,一些系统性风湿性疾病便包括在内。目前,风湿性疾病越来越受到人们的重视,并于1999年正式被世界卫生组织列为继心血管疾病、癌症后威胁人类健康的第三大杀手。由于自身免疫系统疾病的发病机制至今未明,且在我国风湿病专业研究起步较晚,造成其患病率高、致残率高、治疗费用高,并已被我国列入国家中长期科技发展纲要的十大重要疾病之一。研究者们不断探索风湿病的发病机制,发现新的诊断疾病的血清标志物、诊断方法,提高诊断的敏感性和特异性,从而达到早期诊断、早期治疗的目的。本研究旨在探索、证实风湿免疫病的新的诊断方法、血清标志物是否敏感和特异。本研究分成两个部分,第一部分主要探讨抗CD74抗体是否能成为中国汉族人群强直性脊柱炎(Ankylosing Spondylitis,AS)的血清标志物。研究者一直希望能找到新的AS疾病早期就能检测到的血清标志物,近来国外有研究者在AS患者血清中发现抗CD74抗体,且敏感性高,尤其在疾病早期更为敏感。这一发现提示,抗CD74抗体可能成为AS患者的新的血清标志物,并有助于疾病的早期诊断。但目前仍缺少该抗抗体在中国汉族人群中的研究。我国是个人口大国,根据目前的流行病学调查提示AS在我国的发病率在0.3%左右,由于该病起病年龄较早,致残率高,严重影响患者的生活质量,因此早期的诊断,早期的治疗很重要。为此,本研究探讨抗CD74抗体在中国汉族人群AS患者中,能否成为一种新的血清标志物,给早期诊断带来更多的希望。第二部分主要探讨定量超声(quantitative ultrasound,QUS)在风湿性疾病中的应用。我国是世界人口第一大国,随着人口老龄化,老年疾病越来越的的到人们的重视,其中,骨质疏松症(osteoporotic,OP)便是其中之一。尽管其患病率有种族和地区差异,但就总体而言,约有三分之一的60-70岁老人患有骨质疏松症,超过一半的80岁以上老人患有骨质疏松症。自以双能X线吸收法(dual-energy X-ray absorptiometry,DXA)为原理的骨密度测定仪问世以来,为OP筛查带来福音,并被世界卫生组织(the World Health Organization,WHO)推荐为OP诊断的金标准。但DXA所得到的BMD值并不能完整的反映骨强度变化,忽略了很多其他骨折相关的危险因素,且DXA检查不但有射线,而且体积大,费用高。自上个世纪80年代开始,QUS仪便相继问世来评估骨骼的状态,通过检测,QUS得到了超声声束(SOS)值,由于SOS值主要受到得是来自骨弹性和骨结构的影响,它可以提供BMD以外的骨强度和骨质量的信息,因此QUS不仅对骨质疏松具有诊断价值,同时它还具有预测骨折风险的能力。在实际应用上,QUS具有简便、无创、无辐射和价廉等诸多的优势。但目前尚缺少QUS在风湿性疾病中的研究数据,为此本研究用QUS和DXA同时评价风湿性疾病患者的骨骼状态,从而探索QUS能否成为风湿性疾病患者OP和骨折筛查的有力工具。第一部分抗CD74抗体在汉族人群强直性脊柱炎的诊断价值研究强直性脊柱炎是一种慢性的、系统性的自身免疫性关节炎,AS的发病机制目前还未被完全揭示,疾病主要累及的是中轴关节,脊柱和骶髂关节尤是,同时,附着点和下肢的外周大关节是常常受累的部位。如病情未得到控制,会逐渐出现脊柱的畸形和强直,导致患者的肢体功能受限,劳动能力下降甚至消失,给生活质量带来了严重的影响。目前已证实,AS的发病与人类白细胞相关抗原B27分子(HLA-B27)相关,并有明显的家族聚集倾向。研究者们迫切地希望能找到一种新的特异性抗体,而且能在AS疾病早期就能被检测到。最近有文献提示,抗CD74抗体在中轴型SpA患者(n=94)中的阳性率达到了85.1%,而在非脊柱关节病患者中(n=51)中仅为7.8%,且在中轴型SpA患者(n=156)中的敏感性为69%,在早期患者中,阳性率更高,这一结果显示AS患者血清中的抗CD74抗体可作为早期诊断的一个指标。而目前尚无研究验证该抗体在汉族人群AS患者血清中的表达。研究目的:检测中国人群强直性脊柱炎患者血清中抗CD74抗体水平,评估抗CD74抗体能否能成为中国人群AS患者的诊断指标。研究对象和方法:(一)、研究对象:本研究纳入我长征医院风湿免疫科门诊及病房明确诊断的AS患者85例,诊断标准采用1984年纽约标准。健康对照来自我院体检中心46名健康献血者。(二)、方法1、血清样本收集:采集患者及献血者的清晨空腹静脉未抗凝血,经凝集后离心取得其上清,置入冰箱冻存,检测备用。2、检测抗原:选择了三种检测抗原用以检测AS患者血清中抗CD74抗体,这三种抗原分别是:Abnova公司的重组人CD74蛋白,北京义翘神州公司的重组人CD74蛋白和北京赛百盛公司合成CD74肽(CLIP肽)。3、采用酶联免疫吸附测定(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)检测AS患者血清中抗CD74抗体水平。4、统计学处理:两组均值比较采用独立样本t检验,多组均值比较采用单向方差检验。结果:1、AS患者与健康献血者之间抗CD74抗体水平均无显著性差异(t检验,P值皆大于0.05)。2、我们将AS患者的血清从冻存时间上分成两组,一组是已超过5年的,另一组是1年以内。结果显示不论对于何种检测抗原,两个不同冻存时间组之间抗CD74抗体水平均无显著性差异(t检验,P值皆大于0.05)。3、将AS患者分为三个年龄组,在AS患者的三个年龄组之间抗CD74抗体水平均无显著性差异(单向方差检验,P值皆大于0.05)。4、不论对于哪种检测抗原,不同性别的AS患者之间抗CD74抗体水平均无显著性差异(t检验,P值皆大于0.05)。结论:在中国汉族人群AS患者中抗CD74抗体水平与健康献血者相比没有显著差异,在不同年龄组和不同性别之间也没有显著差异,因此,抗CD74抗体不能作为中国汉族人群AS患者的诊断指标。第二部分定量超声在风湿性疾病中应用的研究研究目的:探讨定量骨超声能否能成为风湿性疾病患者筛查骨质疏松症的有力工具。研究对象和方法:(一)、研究对象:本研究纳入我长征医院风湿免疫科门诊及病房明确诊断的OP患者22例,类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者52例,强直性脊柱炎患者18例,骨关节炎(osteoarthritis,OA)患者39例。排除1年内已行DXA检测的患者。(二)、研究方法:对22例OP,以DXA对其腰椎和髋关节测量的同时,用QUS对其桡骨远端1/3的进行测量,分别记录L1-4和髋关节骨密度(bone mineral density,BMD)值,以及桡骨远端超声声速值(SOS)值,进行相关性分析。同时,入组风湿性疾病患者共109例(RA52例、AS18例、OA39例),完成DXA对腰椎和髋关节的测量,以及QUS桡骨远端1/3的测量,分别记录L1-4和髋关节BMD值,以及桡骨远端超声声速值(SOS)值,进行相关性分析。结果:22例OP患者腰椎BMD值和桡骨远端SOS分析结果,r=0.4721,P<0.05;髋关节BMD值和桡骨远端SOS分析结果,r=0.6191,P<0.05。108例风湿性疾病患者腰椎BMD值和桡骨远端SOS分析结果,r=0.3116,P<0.05;髋关节BMD值和桡骨远端SOS分析结果,r=0.3714,P<0.05。结论:在OP患者及风湿性疾病患者中,桡骨远端SOS值和传统DXA所得腰椎及髋关节BMD值都相关,鉴于QUS无射线、经济、无痛无创、简便易行,能成为风湿性疾病患者筛查OP的有效工具。
