独活寄生汤含药血清对体外培养成骨细胞OPG/RANKL基因表达的影响

研究目的 检测独活寄生汤含药血清对成骨细胞OPG/RANKL基因表达的影响,从分子生物学层面探究独活寄生汤治疗骨质疏松症的机理,为独活寄生汤治疗骨质疏松症提供理论及实验依据。 研究方法 体外原代培养SD乳大鼠成骨细胞,分别用生理盐水血清对照组、独活寄生汤含药血清低浓度、中浓度及高浓度作用于成骨细胞,采用MTT法检测独活寄生汤含药血清对成骨细胞生长的影响,采用碱性磷酸酶(ALP)检测成骨细胞活性,并通过RT-PCR及Western Blot法检测独活寄生汤含药血清对成骨细胞OPG、RANKL基因表达的影响。 研究结果 独活寄生汤含药血清以浓度及时间的依赖方式促进成骨细胞生长；并能促进成骨细胞内碱性磷酸酶的活性；RT-PCR结果显示不同浓度的独活寄生汤含药血清能促进OPGmRNA的表达,并且抑制成骨细胞RANKLmRNA的表达；Western Blot结果显示不同浓度的独活寄生汤含药血清能促进成骨细胞OPG蛋白的表达,并且抑制成骨细胞RANKL蛋白的表达。 研究结论 独活寄生汤含药血清可以促进成骨细胞的增值以及OPG的表达,同时抑制RANKL分泌,不但阻碍破骨细胞的成熟及分化,降低破骨细胞活性,同时促进破骨细胞的凋亡,抑制骨吸收。独活寄生汤通过OPG、RANKL系统能够促进成骨细胞的增殖增加骨量,抑制破骨细胞的成熟,减少骨吸收,从而达到治疗骨质疏松的目的。