芦丁及芦丁稀土配合物与DNA相互作用的研究

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作者
曾红娟
机构
[1] 西北师范大学
关键词
DNA; 芦丁稀土配合物; 电化学法; 荧光法;
D O I
暂无
年度学位
2002
学位类型
硕士
摘要
二十一世纪是生命科学的世纪,而DNA作为生命中遗传物质的重要携带者,它已经成为人们研究的焦点。本文主要利用了电化学方法和荧光法对芦丁稀土配合物与DNA的相互作用进行了研究。本论文由四部分组成。 第一部分:DNA与稀土配合物的研究概况 对DNA、金属配合物的研究以及芦丁与芦丁稀土配合物的研究方面的进展进行了总结。从这些总结中了解到,人们之所以选择芦丁作为小分子配体,是由于芦丁所具有的特性:它属于黄酮类化合物,具有独特的药用价值及其临床应用价值,更令人兴奋的是它还具有良好的电活性,这样就可以利用电化学方法来研究其作用机理。由于对于这类物质的稀土配合物与目标分子DNA的作用这方面的报道很少,因此确立选择芦丁的稀土配合物与DNA的相互作用来作为自己的的研究对象。并研究了在进行这种电化学及荧光研究时所需要的基本理论。 第二部分:在醋酸-醋酸钠体系中芦丁(rutin)的电化学研究 用电化学方法研究了在醋酸-醋酸钠(PH=4.46)体系中芦丁在玻碳电极上的电化学行为,发现芦丁在这种体系中其峰电流与扫速成正比,显示了一种表面吸附的过程,而且进一步证明这种吸附为单分子层吸附,通过实验和相关的计算得出在此电极上单位面积的最大吸附量为5.09×10-10mol/cm2,又根据芦丁的结构和计算苯环的面积得出芦丁B坏上的两个邻羟基吸附在电极表面,其A、C环并没有吸附在电极表面上这样一种微观上的结果,展示了电化学研究对探微的巨大优越性。同时这种体系还具有其实用性,可以用来测量芦丁的含量,其检测范围在3.28×10-7-3.28×10-5M,检测极限可达到2.51× 10一SM,而且许多的外来物对这种测量没有干扰。用这种方法来测量芦丁药片,相 对标准偏差为3.5%,结果令人满意。 第三部分:芦丁稀土配合物与DNA相互作用的电化学研究 在醋酸一醋酸钠体系中,对稀土元素铺(Eu)与芦丁以及铺与芦丁反应所生成的配合 物与DNA的相互作用进行了电化学研究,发现铺离子与芦丁的作用是一个一电子一质 子的过程,铺离子在芦丁A、C上的4、5位与芦丁形成这样一种E产一rutin的配合物, 这种配合物与DNA在电极上的反应是一个扩散控制的过程,通过用DNA来滴定 Eus+一rutin配合物时其峰电位与峰电流的变化,可以得出这种配合物以嵌入的模式与DNA 形成超分子配合物,并计算了其键合常数K= 1.42x10“M一,,键合位点数ns月。这些参 数为Eua气rutin酉己合物与D\A结合时结合力的强弱,结合位点的多少提供了参考,有助 于评估它的抗癌活性。 第四部分:芦丁稀土配合物与DNA相互作用的荧光研究 对芦丁稀土颤合物与DNA相互作用用荧光方法进行了进一步的研究,荧光俭测波 长:人ex=266nm,入em=390。I。。主要从以下几个方面来进行论述:1.D琳与四种l说氧核 营酸碱基的特证波长:2.测试条件的最佳化;3.芦丁稀土配合物对DNA荧光的影响; 4.澳化乙锭的荧光验证。从而更直观的看到芦丁稀土配合物与DNA之间的嵌入过程, 并且用澳化乙锭这种已经公认的嵌入试剂进行了证明。根据在最佳条件下DNA与它的 四种碱基的特征激发与发射光谱,可以推断出芦丁稀土配合物主要嵌入在富含鸟缥吟- 胞嚓咤的碱基之间。这项研究对芦丁及芦丁稀土配合物这些广谱抗菌、抗病毒药物的生 理活性的定性分析和定量分析提供了一个非常直观有力的方法和手段,一具有良好的应用 前景。
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