抗肿瘤血管药物TNP-470抑制人SKOV3卵巢癌生长的动物体内实验研究

肿瘤血管形成（Angiogenesis）是指肿瘤内或向肿瘤内生长的异常新生 血管。肿瘤血管的形成对直径＞1-3mm的实体瘤（包括卵巢癌）的进一步生长 很重要，人们正在努力挖掘更为安全有效的血管抑制剂以研究其在肿瘤治疗 中的确切价值。TNP－470[AGM－1470，0－（chloroacetycarbamoyl）]是迄今 为止人们发现的较为理想的抗新生血管药物之一，大量体内外研究试验证 明，它能抑制人体肿瘤的生长，该药现己应用于乳腺癌、Kapos’肉瘤及宫 颈鳞状细胞癌等疾病的Ⅰ-Ⅱ期临床研究，但在卵巢癌领域，其研究很少。 本课题建立人SKOV3巢癌裸鼠皮下移植瘤模型，用TNP-470（分为小、 中、大剂量组各为25mg／kg、50mg／kg及100mg／kg浓度）及化疗药物CTX （100mg/kg）分组治疗，所有组别用药时间均为 3周，计算药物抑瘤率，用 Evision及Tunel’染色等免疫组化法对肿瘤组织微血管进行定量，检测肿瘤 组织中VEGF的表达，并比较各组卵巢癌组织中PCNA（增殖细胞核抗原）的表 达及肿瘤细胞的凋亡和坏死，探讨TNP－470对卵巢癌生长的影响、在肿瘤治 疗中的作用及其机制。 本课题得出如下结果： 1．裸鼠体内实验结果显示，小剂量及中剂量组抑瘤率均小于20％，与 溶剂组比较均无明显差异（P均＞0．05）；大剂量 TNP－470组抑瘤率达 37．6％， 与溶剂组比较有显著差异（P＜0．05）。由此可见，一定剂量的TNP－470对卵 巢癌SKOV3皮下移植瘤有抑制作用，呈剂量依赖关系。 2．单用CTX及中剂量TNP-470治疗裸鼠体内卵巢癌，抑瘤率与空白组比 较均无明显差异（P均＞0．05）；联合应用两种药物后，抑瘤率高达70．5％， 与溶剂组比较，存在很显著差异（P<0．01）。提示，TNP-470与 CTX在治疗 卵巢癌上存在相加效应。 3．Ⅷ因子相关抗原染色显示裸鼠卵巢癌组织中的微血管，TNP－470可 明显降低癌组织中的微血管密度；另外，大剂量的TNP－470使肿瘤组织VEGF 第H军医大学 第3页 表达明显减少（P＜0．05）。提示，TNP－470除了直接针对内皮细胞外，也可能 通过调节肿瘤血管形成相关因子的表达，从而间接干扰肿瘤血管形成。 4．大剂量TNP－470组裸鼠皮下卵巢癌组织中PCNA表达水平较溶剂组有 所下降，但其程度远不如 CTX明显（P＜0．05）；且联合后，中剂量 TNP－470 并不能影响 CTX对肿瘤组织中 PCNA的表达叩＞0 05)，推测 TNP－470不是直 接通过抑制肿瘤细胞DNA的合成及其有丝分裂而抑制肿瘤生长，而是通过抑 制肿瘤血管的形成导致缺血，从而间接抑制了肿瘤的生长。 5．TNP叶70治疗组肿瘤组织中可见明显的凋亡细胞，以散在分布为主， 伴有的现象是血管稀少，肿瘤细胞增殖能力差；TNP－470治疗组坏死灶并不 多，且分布不规则。推测原因有可能是在TNP－470作用下，肿瘤普遍发生缺 血缺氧，使肿瘤细胞生长受抑，同时诱导了肿瘤细胞调亡从而使坏死发生。 在未处理组，肿瘤组织坏死灶多，面积大，且多位于肿瘤中央，肿瘤细胞也 有大量凋亡，但多局限于坏死灶周围，伴有的现象是肿瘤组织含有丰富的血 管，坏死灶以外的肿瘤细胞增殖旺盛。推测原因有可能是肿瘤细胞大量增殖， 远远快于血供的建立，特别是肿瘤中央最易发生凋亡及坏死，因为肿瘤血管 往往是由外向内长入的。 TNP470治疗卵巢癌的机制目前尚未明确，除了针对肿瘤血管的形成， 是否直接作用于肿瘤细胞，或是通过前者间接影响了后者，不能肯定，有待于 今后进一步研究。