雷公藤甲素和雷公藤内酯酮的生物转化研究

雷公藤甲素和雷公藤内酯酮是中药雷公藤（Tripterygium wilfordii Hook．f）中主要二萜类活性化合物。大量研究报导雷公藤甲素可有效地治疗自身免疫性疾病和具有较强的抗白血病和抗肿瘤活性；而雷公藤内酯酮在抗炎、抗生育方面具有较强的活性。但由于雷公藤甲素和雷公藤内酯酮的毒副作用较大，使它们的应用受到了限制。为了发现活性更好、毒副作用更小的活性化合物，人们一直在寻找有效的方法对这类化合物进行结构修饰和改造。 目前，生物转化已成为天然产物结构修饰和改造的有利工具，它是利用生物代谢过程中产生的酶对外源性物质进行结构修饰和改造的化学反应。与化学方法相比，它具有选择性高、条件温和、无污染、成本低、副产物少等优点；可以完成一些用化学方法难以进行的反应。利用生物体系作为生物催化剂可以对天然产物的结构进行修饰，得到一些结构新颖的先导化合物进行药物开发。同时，生物转化也常常作为代谢研究的一种重要工具，在体外预测药物在动物体内的代谢情况。本论文对雷公藤甲素1a和雷公藤内酯酮2a两种天然活性成分进行了生物转化研究，并对转化产物进行了分离、鉴定。 利用长春花和桔梗细胞悬浮体系对雷公藤甲素1a进行生物转化，得到相同的转化产物雷公藤内酯三醇1b。从三十一株微生物中筛选出短刺小克银汉霉（Cunninghamella blakesleana AS 3.970）对雷公藤甲素1a进行生物转化，得到7个转化产物，分别是5a-羟基雷公藤甲素1c、19a-羟基雷公藤甲素1d-a、19β-羟基雷公藤甲素1d-b、雷公藤乙素1e、16-羟基雷公藤甲素1f、雷醇内酯1g和1β-羟基雷公藤甲素1h；其中1c、1d-a、1d-b、1h为新化合物。 利用长春花和桔梗细胞悬浮体系对雷公藤内酯酮2a进行生物转化，得到10个转化产物，分别是雷公藤甲素1a、雷公藤乙素1e、12β,13a-二羟基雷公藤内酯酮2b、5a-羟基雷公藤内酯酮2c、2β-羟基雷公藤内酯酮2d、12a，13a-二羟基雷公藤内酯酮2e、12α,13α-表二羟基雷公藤内酯酮2f、Δ12,13-雷公藤内酯酮2g、14-O-β-D-葡萄糖-表雷公藤甲素2b 鱼翌逊丛巡上型丝左一一一一一一一 和17一经基雷公藤内醋酮21;其中Zb、Ze、Ze、Zf、Zh、21为新化合物。利用黑曲霉 （A塑e李lIu手刀毯阳尹As 3 .739）对雷公藤内酷酮2a进行生物转化，得到4个转化产物， 分别是17一轻基雷公藤内醋酮2i、16一轻基雷公藤内酷酮刀、sa一轻基雷公藤内酷酮2c和 雷公藤甲素1a;其中16一轻基雷公藤内醋酮刀为新化合物。 体外细胞毒活性筛选结果表明，产物Ic、le、If、19、lh、zc、Zd、21、2j和29 对所选的Boc823、HeLa、HL一60、KB和McF一7等5个肿瘤细胞株具有一定的细胞毒 活性，而产物1b、ld、Zb、2f和Zb没有明显作用。体外免疫抑制实验结果表明，产物 lc在1 X10’7岁ml的浓度下，对conA所致的脾细胞增殖有显著的抑制作用，而对正常 脾淋巴细胞无明显影响。