金丝小枣中多酚类物质的分离纯化及活性功能研究

本研究以金丝小枣枣果为材料,对其枣皮、枣核中多酚类物质进行提取、分离及纯化,确定了适宜的分离条件。进而对分离得到的多酚类物质进行了体外抗氧化活性的测定及活体生理功能的研究。主要结果如下: 1、金丝小枣枣果中多酚类物质的最佳萃取条件为:以石油醚脱脂后,乙酸乙酯:蒸馏水=1:1过夜萃取2次,收集乙酸乙酯相,旋转蒸发至干,定量无水乙醇转溶,-20℃保存。然后进行薄层分析,展开剂比例为:乙酸乙酯:无水乙醇:蒸馏水=1:1:0.3。枣皮样品得到一条谱带（R_f=0.8）,枣核样品则得到两条谱带(Rf1=0.62、Rf2=0.77)。 2、将提取得到的枣多酚样品,进行聚酰胺柱层析。依次用30%、50%、75%、90%乙醇溶液30mL分段淋洗,收集各滤液旋转蒸发至最小体积,无水乙醇定量转溶后-20℃保存。结果表明,75%乙醇淋洗得到的多酚产率最高,枣皮样品为80.64%,枣核样品为82.07%。 3、多酚浓缩液经微孔滤膜（d=0.45μm）过滤后进行HPLC分析,最佳分离条件为:HAc调pH=3.5的CH3OH:H2O=25:75体系等梯度洗脱、进样量10μL、流速1.0mL/min、波长276nm。枣皮多酚可分离出3个主要组分(tR1=2.52min、tR2=2.77min、tR3=4.19min);枣核多酚分离出2个主要组分(tR1=2.46min、tR2=4.20min)。标准样品邻苯二酚tR邻苯二酚=2.80min,间苯三酚tR间苯三酚=2.49min。结果表明,枣皮中极可能含有邻苯二酚和间苯三酚;枣核中可能含有间苯三酚。 4、利用BPCLL微弱发光测量仪和紫外-可见分光光度计,测定了多酚物质的体外抗氧化活性。结果表明,其对·OH.、NO2-、DPPH·均具有较明显的抑制作用,且对由·OH引起的DNA损伤也具有较好的保护作用。 5、用枣皮、枣核多酚提取液对试验小鼠进行了抗炎、抗凝血、耐缺氧、血清及脑、心、肝各器官组织超氧化物歧化酶（SOD）及丙二醛（MDA）影响的研究。结果表明,枣皮、枣核多酚提取物对小鼠抗炎、抗凝血、耐缺氧作用明显,并能显著提高体内SOD活性,降低MDA的含量。