人参果胶对人脐静脉内皮细胞迁移的影响

血管生成在肿瘤的发生发展过程中起着重要的作用。血管内皮细胞的迁移是血管生成的关键步骤之一。目前，国内外学者越来越关注果胶对血管内皮细胞迁移的影响。因此，本实验以人参果胶为研究主体，利用划痕实验和趋化小室两种细胞迁移实验方法,分别在半乳凝素-3（Galectin-3，Gal-3），纤连蛋白（Fibronectin，FN），MDA-MB-231细胞条件培养基（MDA-MB-231cell conditioned medium）以及HT29细胞条件培养基（HT29cell conditioned medium）作为趋化剂的条件下，详细研究了人参果胶对人脐静脉内皮细胞（human umbilical endothelial cell，HUVEC）迁移的影响。 本论文选用的8种不同结构的人参多糖级分分别是中性糖WGPA-UDN,阿拉伯半乳聚糖AG1和AG2，高甲酯化的HG型果胶HM-HG以及四种单糖组成不同的RG-I型果胶RG-I-1、RG-I-2、RG-I-3B和RG-I-4。 划痕实验结果显示在三种实验浓度下（0.01mg/ml、0.1mg/ml和1.0mg/ml），WGPA-UDN、AG1和AG2对Gal-3、FN、MDA-MB-231以及HT29细胞条件培养基诱导的HUVEC的迁移没有抑制作用，而HM-HG、RG-I-1、RG-I-2、RG-I-3B和RG-I-4这五种果胶均能显著的抑制HUVEC的迁移，并呈现出浓度依赖性，这种依赖性在Gal-3作为趋化剂时最为明显。当趋化剂为Gal-3时，果胶对细胞迁移的抑制作用最大，在最大浓度1.0mg/ml时，RG-I-4的相对抑制率可达到40%，且在此时，HG型果胶的抑制作用要明显小于RG-I型果胶。在其它三种趋化剂条件下，HG型和RG-I型果胶的作用效果差别不明显，尤其是MDA-MB-231细胞条件培养基作为趋化剂时，两类果胶的相对抑制率几乎一致。四种RG-I型果胶虽然结构不同，但是在相同的趋化剂和实验浓度下，它们的抑制作用没有明显差别。 为了进一步验证了划痕实验的结果，本论文又进行了趋化小室实验，二者的实验结果基本一致。在Gal-3、FN、MDA-MB-231细胞条件培养基和HT29细胞条件培养基作为趋化剂的情况下，中性糖WGPA-UDN、AG型果胶AG1和AG2不能够抑制HUVEC的迁移，另外五种果胶HM-HG、RG-I-1、RG-I-2、RG-I-3B和RG-I-4对HUVEC的迁移均有显著的抑制作用，并呈现出浓度依赖性，且仅在Gal-3作为趋化剂时，四种RG-I型果胶的抑制作用要明显强于HG型果胶HM-HG。HG型和RG-I型果胶对Gal-3介导的细胞迁移的抑制作用最为明显，当浓度为1.0mg/ml时，RG-I-4的相对抑制率为65%，当FN作为趋化剂时，在相同的实验浓度下，RG-I-4的相对抑制率仅为20%左右。 综合上述实验结果以及几种果胶的结构进行分析，我们认为不同类型的人参果胶对细胞迁移的抑制活性与半乳糖醛酸（GalA）的含量和RG-I结构域密切相关，且这两者具有协同作用。在不同的趋化剂条件下，人参果胶对HUVEC迁移的抑制作用可能是通过与趋化剂相互作用，影响其与相应受体的结合来实现的。 本实验的研究结果将为人参果胶抗肿瘤活性研究提供数据支持，为肿瘤新疗法提供理论依据。