目的：骨关节炎（osteoarthritis，OA）是一种常见的中老年人多发疾病，以关节软骨进行性变性和破坏及骨赘形成为病理特点，软骨中IL-1β的表达水平被认为在OA发病过程中发挥着重要作用。IL-1β是IL-1家族成员之一，通过与软骨细胞膜上IL-1RI及IL-1R辅助蛋白(IL-1RAcP)结合形成受体复合物, IL-1RI与IL-1RAcP在细胞域间异二聚化,通过第二信使(cAMP、GTP)等信息传递系统,激活IL-1信号转导。在正常软骨和滑膜组织细胞中IL-1β含量很少，但在OA软骨中则有较高水平的表达。电针治疗通过对患者膝关节周围穴位的刺激，促进机体释放内源性吗啡呔等镇痛物质，提高痛阈，达到镇痛的目的。此外，电针治疗还能促进肌肉收缩及经气运行，从而改善局部血液循环，利于渗出液的吸收及关节面软骨的修复。本课题通过观察电针治疗对兔膝OA的软骨大体形态变化，软骨细胞病理改变，以及对软骨IL-1β表达水平的影响，探讨电针对兔膝OA模型软骨细胞修复的影响及作用机制。方法：（1）对象和干预措施：健康新西兰大白兔（雄性）36只，随机抽取12只为正常对照组，不造模，其余24只兔随机分为模型组12只和电针治疗组12只。模型组和电针治疗组均采用伸直位管型石膏固定左膝关节，上至腹股沟平面下1.5cm，下至踝关节下3cm，建立OA模型。正常对照组和模型组于喂养6w后采用空气栓塞法处死，切开左膝关节，取内侧髁软骨观察造模后相关指标变化，治疗组在进行电针治疗15d后以同样方法观察治疗后相关指标改变情况。电针治疗分别选取兔左下肢内膝眼、外膝眼、足三里、阳陵泉、梁丘五个穴位，每天固定时间进行上述穴位电针治疗25min，持续治疗15d。（2）观察指标：①肉眼观察正常对照组、模型组及电针治疗组兔左膝关节大体形态变化。②切取左膝关节股骨内侧髁软骨，10%中性甲醛溶液固定后，石蜡包埋、切片，作HE染色光镜观察软骨细胞形态及甲苯胺蓝染色观察蛋白多糖和胶原等基质含量变化，按Mankin’s评分标准对软骨大体形态和光镜观察结果进行评分。③免疫组织化学分析：用兔抗IL-1β试剂盒检测左膝关节内侧髁软骨IL-1β的表达变化。（3）统计学处理：用SPSS16.0for WINDOWS行统计学分析。所得数值结果均用x±s表示，P＜0.05为有统计学意义。对兔关节大体形态、软骨细胞、潮线评分结果采用t检验进行两两比较，对甲苯胺兰染色Mankin’s评分结果和免疫组化IL-1β的统计结果采用单因素方差分析和t检验。结果：(1)软骨大体观察：正常对照组左膝关节无明显关节积液，外观软骨面光滑呈蓝白色，色深明亮，无裂纹，软骨结构Mankin’s评分为0分。模型组左膝关节大部分出现关节积液，所有软骨表面呈灰黄色，关节面粗糙，部分出现糜烂且光泽度降低，软骨表面略有不平，较粗糙。电针治疗组大部分动物出现关节积液及滑膜增生，软骨改变以粗糙为主，但程度较轻。电针治疗组与模型组按Mankin’s评分比较软骨结构，有统计学差异（P<0.05）。（2）HE染色和甲苯胺蓝染色病理学观察：正常对照组HE染色示软骨表面平整，软骨层厚薄均匀，软骨细胞排列整齐，细胞大小一致，潮线完整；甲苯胺蓝染色均匀，无基质失染。模型组HE染色示软骨表层出现溃烂缺失，软骨层厚度明显变薄，软骨细胞大量减少，细胞大量簇聚，潮线紊乱；甲苯胺蓝染色明显变浅。电针治疗组软骨表面较规则，裂隙少，软骨细胞排列较整齐，与模型组相比，软骨细胞数明显增多，软骨层厚度增厚，可见潮线紊乱；甲苯胺蓝染色轻度变浅。按Mankin’s评分正常对照组与模型组、模型组与电针治疗组间比较，均有差异出现(P<0.05)。（3）软骨免疫组化IL-1β测定情况：正常对照组仅表层软骨细胞内偶见IL-1β弱阳性表达，为胞质内少许黄褐色颗粒；模型组的软骨基质、胞浆中均有IL-1β表达，全层可见，尤以中层密度最高，成熟软骨细胞中较多，为深黄褐色颗粒；电针治疗组中，软骨表层可见散在的软骨细胞胞浆中存在IL-1β表达，为浅黄褐色颗粒。正常对照组与模型组、模型组与电针治疗组间比较，差异均有显著意义(P<0.01)。结论：（1）采用伸直位管型石膏固定法制作兔膝OA模型能较好地模拟OA的发病过程，本实验中造模成功。（2）IL-1β具有促进关节软骨细胞外基质（extracellular matrix, ECM）降解的作用，对加重软骨损伤、破坏有着十分重要的影响。（3）电针能有效治疗膝OA，其作用机制可能与减少软骨中IL-1β的含量，促进蛋白多糖的合成，利于软骨细胞的修复，促使软骨基质含量的增多等有一定关系。
