参麦注射液对心肌细胞急性缺血再灌注损伤保护作用及机制的研究

当冠状动脉发生堵塞后,及时的恢复血流供应对心肌是一种十分有效的保护 措施。临床上针对一些急性心肌梗死和冠脉狭窄的病人,已广泛开展药物溶栓法 和冠脉成形术等的应用。然而近年发现,再灌注同样会对心脏产生损伤。其不仅 可能抵消血流恢复的有益作用,而且还有可能造成更严重的后果。这种现象被称 为“缺血再灌注损伤”。 缺血再灌注损伤包括再灌注心率失常、微血管损伤、可逆性的心功能障碍以 及由坏死和凋亡导致的细胞死亡。导致再灌注损伤的机制是多方面的,氧化应激、 细胞内 Ca2+超载、中性粒细胞活化都参与了心肌结构与功能的改变。 如何解决再灌注造成的损伤,已经成为当前心血管疾病研究领域的热点问题。 在寻求安全有效药物的过程中,人们越来越将目光集中到中医中药上。大量基础 研究与临床实践证实,采用中药制剂或中药有效成分提取物治疗心肌缺血再灌注 损伤,其治疗效果明确,且有效药物种类多、单一药物作用靶点广泛。 参麦注射液是由传统补气养阴方剂生脉散衍变而来,功能益气固托,养阴生 津,生脉。药理研究表明,其具有抗休克、抗心率失常、抗炎、强心和调节血压 的作用。既往研究发现,参麦注射液能减轻脂质过氧化,改善血流变,促进心功 能的恢复,从而保护缺血再灌注心脏。本实验将利用先进的技术手段,进一步观 察参麦注射液对急性心肌缺血再灌注损伤的保护作用并探讨其可能机制。 实验选用出生 3-4 天的 Wister 大鼠进行心肌细胞培养。通过加入含氧清除剂 Na2S2O4 的 D-Hank’s 液造成细胞缺糖、缺氧、缺钙,再换成正常培养液恢复糖、 氧、钙的供应,以模拟整体条件下的心肌急性缺血再灌注损伤,建立培养心肌细 胞的缺血再灌注损伤模型。治疗组于再灌同时加入参麦注射液。首先经 MTT 法检 测不同药物浓度、不同再灌时间下细胞的存活率,以确定用参麦注射液治疗的最 佳药物剂量和最佳再灌时间。然后再针对再灌注心肌细胞心率(律)、细胞形态、 细胞凋亡百分率以及细胞内 Ca2+浓度等几方面进行观察分析。 结果发现:参麦注射液能显著改善受到缺血再灌注损伤的心肌细胞心率的增 快,减少心律失常的发生;从形态学上观察,可有效减轻细胞肿胀变形、胞膜破 裂、胞浆空泡化、及 DNA 凝集等损伤变化;参麦注射液治疗组再灌注后细胞凋亡 百分率明显降低;同时,心肌细胞内再灌注钙超载的现象也受到抑制。 以上结果说明,参麦注射液能够显著减轻缺血再灌注造成的心肌细胞损伤, 使细胞结构和功能趋于恢复正常。这种保护作用的机制之一是通过减轻细胞内 Ca2+超负荷进而抑制细胞凋亡实现的。