应激引起大鼠海马神经生化改变的研究

背景与目的：海马属于边缘系统，参与学习记忆和情绪过程的调节，对应激反应起负反馈调控作用。海马是一个具有可塑性的和易受损的部位。研究表明慢性应激可以引起海马功能和形态结构损害，而急性应激却不引起海马器质性损害。有研究提示慢性应激损害海马可能与兴奋性氨基酸(excitatory amino acid，EAA)堆积、N-甲基-D天冬氨酸受体(N-methl-D-aspartate receptor，NMDAR)活性增高和一氧化氮(nitric oxide，NO)生成过量有关。本研究旨在观察急慢性应激对大鼠海马EAA天冬氨酸和谷氨酸和抑制性氨基酸γ一氨基丁酸(GABA)的影响，并进一步观察慢性应激对大鼠海马NO含量的影响以及NMDAR拮抗剂氯胺酮和一氧化氮合酶(nitric oxide synthase，NOS)抑制剂L-硝基-精氨酸甲酯(N-nitro-L-arginine methyl ester,L-NAME)对慢性应激大鼠海马氨基酸类神经递质和NO含量的效应，以探讨慢性应激损害海马的神经生化机制。 材料与方法：大鼠随机分为对照组、应激1天、应激3天、应激7天、应激14天和应激28天等6组；以应激7天组为慢性应激组(简称应激组)，在此基础上增加两个应激给药组。应激模型为强迫游泳，每天一次，每次20分钟。根据分组分别应激1天、3天、7天、14天和28天。两个应激给药组于每次应激前分别腹腔注射氯胺酮或L-NAME，应激7天，对照组未给予处理。采用高效液相色谱仪测定海马谷氨酸、天冬氨酸和GABA含量，用硝酸还原酶法测定海马NO含量。 — ————————— 结果：对照组的大鼠海马天冬氨酸与谷氨酸含量分别为 2＊03t0．27 moVg和6．41 ito．638 u moVg，与之比较，应激1大组天 冬氨酸和谷氨酸含量（分别为 1．996t0．258 n mow和 5．55610．505 u mo吨）无显著变化①＞0刀5）；3天组、7大组、14天组和28大组大 鼠海马大冬氨酸含量（分别为 2．717f0．258 u mollg、2＊9610．317 u mollg、2．83肚0．438 11 mollg和 4．64肚0＊37 11 moVg）和谷氨酸含量（分 别为 7．sl 8t0．799 u moVg、9．00710．520 u molig、8＊4peo ＊33 u moVg 和 8．129ti．556 u moUg）显著增高（P＜0．05）。对照组大鼠海马 GABA 含量为 3厂19to．528 u moVg；与H比较，应激 1天组大鼠海马 GABA 含量（2．747t0．339 u mO吨）显著降低（P＜0．05），14天组和 28天组 GABA含量（分别为 4．46肚0．883 11 moUg和 4．49710．857 11 moVg）显 著高于对照组O仍．05人3天组和7天组的GABA含量（分别为 3．336t0．464 u mol／g和 3．598t0．407 u moljg）与对照组之间的差异无显 一 著性（P＞0刀5）。 应激组、应激给药氯胺酮组和应激给药L上呵AME组大鼠海马天 冬氨酸含量（分别为 2．69610317 u mol／g、2．825t0．447 u moUg和 2．828土0．332 11 moUg）和谷氨酸含量（分另为 9．00710．520 P moUg、 8．74壮0．332 p mo鸣和8．48D0．565 p mo咋）显著高于对照组（N0．05）。 应激给药 L…组大鼠海马 GABA含量G．146f0．220 n moUg）较 对照组和应激组显著降低om05），应激给药氯胺酮组o．548f0．542 u moVg人应激组和对照组之rd GABA含量的差异无显著性0＞0仍） 应激组大鼠海马NO含量门3．9壮67．32——屿）较对照组 门．6地9．46nlnOw）显著增高0们．05），应激给药氯胺酮组和应 飞 激给药 L－NM 组含量（分别为 190．spesl．08－l／g和 209．25145．40mOw）与对照组之间的差异无显著性（P＞0．05）。 结论： 1）在每大强迫游泳20分钟的应激实验中，于第3天开始大鼠海 马兴奋性氨基酸天冬氨酸和谷氨酸含量持续增高；抑制性氨基酸 2 — ——————— GABA含量在急性应激时降低，于应激 14天后开始增高。提示兴奋 性氨基酸大冬氨酸和谷氨酸在慢性应激反应中起着重要作用，而抑制 性氨基酸GABA可能也参与了应激反应。 2）大鼠接受一周的每天强迫游泳20分钟的应激实验，NO含量 明显升高。提示NO含量升高可能参与应激损害海马。 3）NMDAR阻断剂氯胺酮可抑制慢性应激引起的NO含量升 高。提示NO含量升高与NMDAR激活有关。 4）NOS抑制剂L－NAME可抑制慢性应激引起的NO含量升高。 提示NO含量升高与NOS活性增高有关。