研究背景：肿瘤复发转移是一直困扰着临床医生的重要课题,限制着临床疗效的提高。肿瘤复发转移过程中,机体免疫调节相关的细胞和因子发挥着重要作用。既往研究认为,巨噬细胞在荷瘤机体中发挥着抗肿瘤作用,但随着研究的深入,人们认识到肿瘤间质中的巨噬细胞,即肿瘤相关巨噬细胞(TAM)发挥的可能是促肿瘤作用。TAM是偏向M2型活化的巨噬细胞,具有促进肿瘤发生、发展、侵袭、转移、抑制免疫应答、促进肿瘤组织新生血管和微淋巴管形成的作用。中医药在防治肿瘤复发转移方面起着积极作用,多年的临床经验和实验研究显示扶正解毒法是防治肿瘤术后复发转移的重要治疗法则,其机制与提高机体免疫监视功能、降低肿瘤细胞的免疫逃逸有关。在前期研究的基础上,我们提出中医药对TAM的免疫重塑是中医药肿瘤治疗的新靶点,临床制剂扶正解毒方对TAM的调节是中医药防治肿瘤转移的可能机制。
研究方法：60只近交系615小鼠随机分为5组,每组12只：空白对照组(简称空白组)、模型对照组(简称对照组)、中药组、化疗组、中西医结合组(简称中西组)。空白组为非荷瘤组,其余四组为荷瘤组(腋下接种前胃癌MFC细胞)；对照组给予纯净水灌胃21天；中药组给予扶正解毒方灌胃21天；化疗组给予5-氟尿嘧啶(5-Fu)腹腔注射7天；中西组给予5-Fu腹腔注射7天同时给予扶正解毒中药灌胃21天。药物干预期间,每3天测量小鼠腋下瘤径,并绘制肿瘤生长曲线；干预21天后,摘取小鼠肺组织观察肺转移灶,并计算肺转移抑制率；剥离腋下肿瘤组织,称取瘤重并计算抑瘤率；另取每组10只小鼠,观察生存期；免疫组化法检测各组肿瘤组织中CD68+巨噬细胞浸润程度,流式细胞仪检测M2型(F4/80+CD206+)巨噬细胞含量；摘取小鼠脾脏,称量重量,流式细胞仪检测脾脏中CDllb+F4/80+巨噬细胞、髓系抑制细胞(MDSC)的含量；取小鼠血清,ELISA法检测血清中IL-4、11-10、 IL-13、TGF-β的含量。
结果：1.肿瘤生长体积比较：对照组>中药组>化疗组>中西组,其中中西组肿瘤生长速度最慢,化疗组和中西组的肿瘤体积在各时间段显著比对照组、中药组小(P<0.05)；2.瘤重比较：对照组>中药组>化疗组>中西组,对照组平均瘤重最大,达到4.03±1.53g,中西组瘤重最小,为1.88±0.75g,化疗组、中西组与对照组相比较,瘤重明显减轻(P<0.05);3.抑瘤率比较：中西组>化疗组>中药组,其中中西组抑瘤率最高,达53.35%；4.肺转移：各组转移总数比较：对照组>中药组>化疗组>中西组,其中中西组转移总数最少,且肺转移抑制率最高,为55.56%,其次为化疗组(44.44%),两组的肺转移抑制率均明显高于中药组(2.78%)；5.各组生存期比较：对照组>中药组>化疗组>中西组,生存时间最长的是中西组；6.巨噬细胞浸润程度：化疗组、中西组巨噬细胞浸润程度比对照组、中药组减轻；7.M2型巨噬细胞(F4/80CD206+)含量的比较：对照组>中药组>化疗组>中西组,含量最高的是对照组,占0.84±0.21%,含量最低为中西组,为0.47±0.15%;8.脾脏重量比较：中西组>对照组=空白组>中药组>化疗组,其中化疗组脾脏最轻(0.09±0.04g)；9.脾脏巨噬细胞(CDllb F4/80)含量比较：对照组>化疗组>中药组>中西组>空白组,中西组与对照组、化疗组比较,CDllb'F4/80巨噬细胞含量明显减少(P<0.05)；10.髓系抑制细胞MDSC (CDllb Gr-1)含量的比较：对照组>化疗组>中药组>中西组>空白组,中西组、中药组与对照组比较,MDSC含量明显减少(P<0.05)；11.血清中M2型巨噬细胞趋化因子及分泌因子含量比较：IL-4：对照组>化疗组>中药组>中西组>空白组,IL-10：对照组>中药组>化疗组>中西组>空白组,IL-13：对照组>中药组>化疗组>中西组>空白组；TGF-β:对照组>化疗组>中药组>中西组>空白组;
结论：扶正解毒方联合化疗能有效抑制小鼠前胃癌生长,减轻荷瘤小鼠肺转移程度,延长生存期,改善荷瘤小鼠预后,其作用机制在于减轻肿瘤组织中CD68+巨噬细胞浸润程度,减少M2型巨噬细胞的含量；降低血清中M2型巨噬细胞诱导因子及所分泌的免疫抑制因子IL-4, IL-10, IL-13, TGF-β的含量；降低免疫抑制细胞(CDllb'F4/80巨噬细胞、MDSC)在脾脏中的含量,重塑机体免疫功能。
