survivin短发夹状RNA真核表达载体的构建及其对宫颈癌细胞survivin表达的影响

被引：6

作者：

宋晖 ^{[1
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辛晓燕 ^{[1
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肖锋 ^{[2
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王德堂 ^{[1
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岳乔红 ^{[3
]}

郭会玲 ^{[1
]}

机构：

[1] 第四军医大学西京医院妇产科

[2] 第四军医大学西京医院放射治疗科

[3] 第四军医大学西京医院临床分子生物学研究中心

来源：

医学研究生学报 | 2008年 / 08期

关键词：

survivin; 短发夹状RNA; 真核表达载体; 宫颈肿瘤;

D O I：

暂无

中图分类号：

R737.33 [子宫肿瘤];

学科分类号：

100214 ;

摘要：

目的:构建survivin基因短发夹状RNA(shRNA)真核表达载体,并观察其对宫颈癌细胞survivin表达的抑制作用。方法:设计、合成2对survivin特异性微小片段RNA引物(s1、s2),退火连接后利用DNA重组技术,将其分别克隆入真核表达载体pSilencer 2.1-U6 neo,酶切、鉴定测序后,经脂质体转染宫颈癌HeLa细胞,G418筛选阳性克隆,半定量RT-PCR检测survivin mRNA表达,Western blot检测survivin蛋白表达。结果:成功构建了survivin shRNA真核表达载体pSilencer2.1-s1和pSilencer2.1-s2,G418筛选24 d后出现阳性克隆,转染pSilencer2.1-s1和pSilencer2.1-s2的HeLa细胞中,survivin表达呈现不同程度下调,pSilencer2.1-s2的干涉效果较好。结论:成功构建并筛选出干涉效果较好的survivin shRNA真核表达载体,为进一步研究其对宫颈癌细胞生物学行为的影响奠定了实验基础。

引用

页码：795 / 799+897 +897

页数：6

共 5 条

[1] RNA interference: potential therapeutic targets [J].