双重数字PCR在转基因大豆检测中的应用附视频

被引:9
作者
刘晓 [1 ]
朱鹏宇 [2 ]
景小艳 [2 ]
李志红 [1 ]
张永江 [2 ]
李想 [3 ]
付伟 [1 ,2 ]
机构
[1] 中国农业大学植物保护学院
[2] 中国检验检疫科学研究院
[3] 上海海关动植物与食品检验检疫技术中心
关键词
双重数字PCR; 转基因大豆; 定量检测;
D O I
10.19586/j.2095-2341.2019.0077
中图分类号
S565.1 [大豆];
学科分类号
摘要
利用微滴式数字PCR(droplet digital PCR,dd PCR)平台建立针对MON87705、MON87769、DP356043三种转基因大豆中外源基因的双重PCR检测方法。利用双重数字PCR方法检测特异性、定量范围等参数,优化所用引物探针组合及实验体系程序,检测外源基因与内标准基因的拷贝数。结果表明,所用引物探针组合在数字PCR方法中仅对目标大豆品系有荧光信号,具有特异性,可用于转基因大豆品系的筛选与鉴别。检测了大豆的转基因成分含量,结果与材料标准品参数基本一致,并根据结果设定定量检测限为0.5%,定性检测限为0.05%,可满足低纯度样品检测的需求。双重数字PCR体系能够准确且稳定的满足实际检测需要,在实际应用上具有良好的发展前景。
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