顽拗植物类群的总DNA制备(英文)

被引:51
作者
曾杰
邹喻苹
白嘉雨
郑海水
机构
[1] 中国林业科学院热带林业研究所
[2] 中国科学院植物研究所系统与进化植物学开放研究实验室
关键词
西南桦; 多糖; DNA制备; RAPD; 限制性酶切;
D O I
暂无
中图分类号
Q943 [植物细胞遗传学];
学科分类号
071007 ; 090102 ;
摘要
从富含多糖的顽拗植物类群提取与纯化DNA是许多研究领域例如居群生物学、生物多样性、分子标记辅助育种研究普遍遇到的难题。以西南桦 (Betulaalnoides)为例发展了一套改进的方案 ,有效地从这种顽拗植物的干叶和鲜叶中制备了DNA。此方案包括 3个关键步骤 :首先从植物细胞匀浆中用不含CTAB的缓冲液洗去大部分多糖和其他次生物质 ;在提取介质中采用 3%CTAB而不是通常用的 2 %CTAB ;将常用的高盐去糖的纯化操作提前到用异丙醇沉淀DNA之前进行。从西南桦提取的DNA已成功地用于RAPDPCR扩增和限制性酶切。这个简单、经济和可靠的改进方案也适用于许多其他的顽拗植物类群。
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