食管癌细胞NGAL基因-152～-60区段存在TPA反应元件附视频

被引：4

作者：

许丽艳 ^{[1
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李恩民 ^{[2
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牛永东 ^{[2
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蔡唯佳 ^{[3
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袁华敏 ^{[2
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常静霞 ^{[2
]}

沈忠英 ^{[3
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曾毅 ^{[1
]}

机构：

[1] 北京工业大学生命科学与生物工程学院病毒与药理研究室

[2] 汕头大学医学院生物化学与分子生物学教研室

[3] 汕头大学医学院肿瘤病理研究室

来源：

生物化学与生物物理进展 | 2006年 / 02期

基金：

广东省自然科学基金;

关键词：

中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白基因; 食管癌细胞; 基因表达调控; TPA反应元件;

D O I：

暂无

中图分类号：

R735.1 [食管肿瘤];

学科分类号：

摘要：

以往研究发现,在TPA诱导永生化食管上皮细胞癌变中中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(neutrophilgelatinase-associatedlipocalin,NGAL)基因过表达,但过表达机制不明.最近研究提示,食管癌细胞NGAL启动子及其邻近区域可能存在着TPA反应元件.为了对NGAL的这一TPA反应元件进行更准确定位,采用PCR法结合嵌套缺失实验从食管癌细胞中克隆了NGAL5′侧翼区-152～+84、-140～+84、-78～+84、-59～+84、-50～+84、-41～+84、-37～+84、-29～+84和-10～+84等片段,并定向插入pGLB、pGLP或pGLE等萤火虫荧光素酶报告基因表达载体中,构建了pGLB-152、pGLP-152、pGLE-152、pGLB-140、pGLB-78、pGLB-59、pGLB-50、pGLB-41、pGLB-37、pGLB-29和pGLB-10等系列报告基因表达载体.将上述报告基因表达载体分别同pRL-TK共转染食管癌细胞EC109,并用TPA刺激,检测TPA刺激转染EC109的相对荧光素酶活力,综合判定NGAL-152～+84区不同长度片段的TPA反应性,对NGAL启动子区的TPA反应元件给予进一步分段定位.结果表明,NGAL启动子区的TPA反应元件位于-152～-60区段,而且应答TPA刺激的反应能力很强.生物信息学分析结果显示,NGAL启动子区所存在的TPA反应元件很可能是一种新结构类型.研究说明,NGAL在DNA序列上有应答TPA刺激的结构基础,将有助于深入到分子水平揭示TPA诱导永生化食管上皮细胞癌变中NGAL过表达机制,也有助于进一步认识TPA信号细胞内传递途径网络在肿瘤发生发展中的作用.

引用

页码：140 / 148

页数：9

共 7 条

[1] NGAL基因5′侧翼区转录调控元件的分段定位鉴定
许丽艳
李恩民
蔡唯佳
王子良
牛永东
沈忠英
曾毅
[J]. 肿瘤防治杂志, 2004, (05) : 449 - 453
[2] 反义封闭NGAL基因表达对SHEEC食管癌细胞微丝骨架的影响
林珏龙
许丽艳
李恩民
蔡唯佳
牛永东
方昆阳
熊华淇
沈忠英
曾毅
[J]. 生物化学与生物物理进展, 2004, (05) : 409 - 415
[3] NGAL基因5’侧翼区转录调控元件萤火虫荧光素酶报告基因表达载体的构建与鉴定
许丽艳
李恩民
蔡唯佳
沈忠英
曾毅
[J]. 癌变畸变.突变., 2004, (01) : 5 - 8
[4] SHEEC食管癌细胞中NGAL基因的功能
李恩民
许丽艳
蔡唯佳
熊华淇
沈忠英
曾毅
[J]. 生物化学与生物物理学报, 2003, (03) : 247 - 254
[5] NGAL的结构与功能研究进展
许丽艳
李恩民
熊华淇
[J]. 生命科学, 2002, (01) : 27 - 29
[6] NGAL基因在永生化食管上皮细胞恶性转化中过表达的研究
许丽艳
李恩民
熊华淇
蔡唯佳
沈忠英
[J]. 生物化学与生物物理进展, 2001, (06) : 839 - 843
[7] Study of immortalization and malignant transformation of human embryonic esophageal epithelial cells induced by HPV18 E6E7
Shen, ZY
Cen, S
Shen, J
Cai, WJ
Xu, JJ
Teng, ZP
Hu, Z
Zeng, Y
[J]. JOURNAL OF CANCER RESEARCH AND CLINICAL ONCOLOGY, 2000, 126 (10) : 589 - 594

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