骨碎补总黄酮联合纳米骨材料促进MC3T3-E1细胞的增殖分化

被引：47

作者：

李晋玉 ^{[1
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俞兴 ^{[1
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姜俊杰 ^{[2
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徐林 ^{[1
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赵学千 ^{[1
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孙旗 ^{[1
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郑晨颖 ^{[1
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白春晓 ^{[1
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刘楚吟 ^{[1
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贾育松 ^{[1
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机构：

[1] 北京中医药大学东直门医院

[2] 中国中医科学院中医临床基础医学研究所

来源：

中国组织工程研究 | 2020年 / 24卷 / 07期

关键词：

骨碎补总黄酮; 纳米骨; Wnt/β-catenin信号通路; 成骨细胞; MC3T3-E1细胞;

D O I：

暂无

中图分类号：

R329.2 [人体细胞学]; TB383.1 [];

学科分类号：

100107 [人体解剖与组织胚胎学（人体解剖学、组织与胚胎学）];

摘要：

背景:前期研究发现,骨碎补总黄酮可促进纳米骨材料表面MC3T3-E1细胞的成骨分化,其作用机制有待进一步研究。目的:探究骨碎补总黄酮联合纳米骨材料对MC3T3-E1细胞发挥作用的机制。方法:将MC3T3-E1细胞与纳米骨材料共培养,选取100 mg/L和250 mg/L骨碎补总黄酮进行药物干预,以10μg/L转化生长因子β刺激为阳性对照组。分组如下:①正常组;②DKK1组:Wnt通路抑制剂DKK1(0.1 mg/L)阻断Wnt/β-catenin信号通路;③DKK1+转化生长因子β组;④DKK1+100 mg/L骨碎补总黄酮组;⑤DKK1+250 mg/L骨碎补总黄酮组;⑥DKK1+纳米骨+转化生长因子β组;⑦DKK1+纳米骨+100 mg/L骨碎补总黄酮组;⑧DKK1+纳米骨+250 mg/L骨碎补总黄酮组。在干预24,48 h后收获细胞,免疫荧光双染法观察Wnt/β-catenin通路中Wnt与LRP结合情况,Real-time PCR和Western blot检测β-catenin、LRP5、Gsk-3β、Cyclin D1、RUNX2的表达。结果与结论:①激光共聚焦扫描显微镜下显示DKK1+转化生长因子β组、DKK1+250 mg/L骨碎补总黄酮组、DKK1+纳米骨+转化生长因子β组、DKK1+纳米骨+250mg/L骨碎补总黄酮组棕黄色染色较明显,表明Wnt与LRP结合较其他组更好;②Real-timePCR和Westernblot结果显示,骨碎补总黄酮可促进β-catenin、LRP5、RUNX2的表达,下调GSK-3β的表达,说明骨碎补总黄酮通过激活经典Wnt/β-catenin信号通路促进成骨细胞增殖分化,且骨碎补总黄酮诱导的基因活化呈剂量依赖性。

引用

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页数：7

共 27 条

[1]

骨碎补总黄酮对激素性股骨头坏死的实验研究 [D].