费氏弧菌β-内切葡聚糖酶基因在大肠杆菌中的表达及酶学分析

被引：3

作者：

王海青

孟欣

洪玉枝

刘子铎

机构：

[1] 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室

来源：

农业生物技术学报 | 2007年 / 06期

关键词：

费氏弧菌; β-内切葡聚糖酶; 同源分析; 酶学分析;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q78 [基因工程（遗传工程）];

学科分类号：

071007 ; 0836 ; 090102 ;

摘要：

以费氏弧菌(Vibrio fischeri)EM17基因组DNA为模板,通过PCR方法克隆了该菌的β-内切葡聚糖酶基因(GenBank登录号:EF533943)。将其插入到表达载体pGEX-6p-1中,转化大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)诱导表达。测序结果经DNAMAN软件分析,该基因与费氏弧菌ES114基因组预测的β-内切葡聚糖酶基因同源性达到97.1%,但与其它β-内切葡聚糖酶基因同源性较低。酶学性质研究表明,该酶的最适反应温度为60℃,最适反应pH为9.0。同时研究了6种金属离子对该酶活性的影响,结果显示该酶活性依赖金属离子的存在:Mg2+和Ca2+对酶有激活作用;Mn2+和Pb2+则严重抑制该酶的活性。

引用

页码：1029 / 1033

页数：5

共 7 条

[1] 细菌纤维素酶研究进展 [J].

陈春岚 ;

李楠 .

广西轻工业, 2007, (01) :18-20

[2] 热纤梭菌内切β-1,4-葡聚糖酶基因celD在大肠杆菌中的表达及酶学特性分析 [J].

常巧玲 ;

孙建义 ;

许英蕾 ;

钱利纯 .

农业生物技术学报, 2006, (06) :1000-1001

[3] P137G点突变对嗜热细菌木糖异构酶酶活性及热稳定性的影响 [J].

郭亭 ;

鲍晓明 .

山东大学学报(理学版), 2006, (06) :145-148+156

[4] 穿梭表达载体pYG43的构建及碱性纤维素酶基因的分泌表达 [J].

马磊 ;

蔡勇 ;

杨明明 ;

李青旺 ;

樊俊华 ;

祁艳霞 ;

吴迪 ;

张西峰 ;

齐枫 .

安徽农业科学, 2005, (03) :448-450

[5] 纤维素酶研究综述 [J].

王巧兰 ;

郭刚 ;

林范学 .

湖北农业科学, 2004, (03) :14-19

[6] 城市生活垃圾中易堆腐物的生物降解初步研究 [J].

杨谦 ;

Kasem Soytong .

环境卫生工程, 2000, (03) :111-113

[7]

Alkaline cellulases from alkaliphilic Bacillus: Enzymatic properties, genetics, and application to detergents[J] . Susumu Ito.Extremophiles . 1997 (2)

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