糖蛋白质组学方法研究人类免疫缺陷病毒感染相关糖蛋白

被引：2

作者：

贾小芳 ^{[1
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陈军 ^{[1
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马芳 ^{[1
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姚亚敏 ^{[1
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卢洪洲 ^{[1
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张丽军 ^{[2
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机构：

[1] 上海市公共卫生临床中心科学研究部

[2] 中南大学临床药理研究所

来源：

中华传染病杂志 | 2011年 / 04期

关键词：

HIV感染; 蛋白质组学; 糖蛋白类; 质谱分析法; α1抗胰蛋白酶; 蛋白质前体;

D O I：

暂无

中图分类号：

R51 [传染病];

学科分类号：

100201 [内科学];

摘要：

目的研究HIV感染相关的人血浆糖蛋白质组变化,筛选新的抗病毒蛋白质或药物靶标。方法采用亲和纯化法去除AIDS患者(n=10)和健康对照(n=20)血浆中的白蛋白和免疫球蛋白,富集低丰度蛋白质。双向凝胶电泳(2-DE)分离富集的蛋白质,糖基化试剂盒染色,构建AIDS患者血浆糖基化蛋白二维凝胶电泳图谱,ImageMaster软件分析表达差异的糖蛋白,并进行质谱鉴定。对去除高丰度蛋白质的HIV和健康对照血浆进行PNGase F酶解,使糖蛋白去糖基化,二维凝胶电泳结合ImageMaster图像分析比较酶解后两类样品的差异蛋白质。差异糖蛋白经液相色谱串联高容量离子阱质谱(HCT)分析鉴定。结果经试剂盒处理,成功去除了血浆中高丰度的白蛋白和球蛋白,富集了低丰度蛋白质,获得HIV阳性感染者和健康对照血浆糖蛋白的二维凝胶电泳图谱,经PNGaseF酶解,使糖蛋白去糖基化,经液相色谱质谱分析,鉴定了13个差异糖基化蛋白质点,包括α1-抗胰蛋白酶前体蛋白、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶N1等。结论筛选到可能与HIV感染相关的糖蛋白,如α1-抗胰蛋白酶前体蛋白等,为了解HIV感染机制及新的抗病毒药物靶标分子的筛选提供了帮助。

引用