罗布麻总黄酮通过PI3K/Akt/GSK3β抑制H2O2诱导的EA.hy926凋亡机制研究

心血管疾病严重危害人类健康,其致病机制主要是氧化应激诱导的内皮细胞凋亡,保护内皮细胞免受氧化应激损伤是防治心血管疾病的关键。为了探讨罗布麻总黄酮（total flavonoids of Folium Apocyni Veneti,TFF）抑制过氧化氢（hydrogen peroxide,H2O2）诱导的EA.hy926细胞凋亡的机制,采用不同浓度TFF处理EA.hy926细胞,一定浓度的H2O2造模,通过MTT法、Hoechst33342/PI荧光双染、流式细胞术检测各组的细胞凋亡情况,并用Western-blot和荧光定量PCR检测相关蛋白及m RNA的表达水平。研究发现,H2O2能明显诱导EA.hy926细胞凋亡,而TFF可降低H2O2引起的内皮细胞凋亡,表现为凋亡率降低、线粒体膜电位（mitochondrial membrane potential,MMP）增加、裂解的半胱天冬酶-3,-9（cleaved caspase-3,-9）表达减少、髓细胞白血病因子-1（myeloid cell leukemia-1,Mcl-1）表达增加、磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B/糖原合成酶激酶-3β（phosphatidylinositol-3-kinase/protein kinase B/glycogen synthase kinase-3β,PI3K/Akt/GSK3β）通路中Akt、GSK3β蛋白的磷酸化水平升高。上述结果表明,TFF主要是通过激活PI3K/Akt/GSK3β通路,调节Mcl-1的表达,保护MMP,进而抑制caspase蛋白的剪切活化,抑制H2O2诱导的EA.hy926凋亡。