双价抗虫植物表达载体p3300-bt-pta的构建及转基因烟草的初步检测

被引：15

作者：

范媛媛

庞永珍

吴为胜

姚剑虹

唐克轩

武天龙

机构：

[1] 上海交通大学农业与生物学院

[2] 复旦大学生命科学学院遗传工程国家重点实验室

[3] 上海交通大学农业与生物学院上海

[4] 上海

来源：

上海交通大学学报(农业科学版) | 2004年 / 01期

关键词：

双价抗虫; 半夏凝集; pta基因; cryIA(a/c)基因; 载体构建; 转基因植株;

D O I：

暂无

中图分类号：

S572 [烟草（菸草）];

学科分类号：

0901 ;

摘要：

用限制性内切酶HindⅢ酶切分别含有CryIA(a)和CryIA(c)基因的pGEM-4zf质粒得到Ubiquitin(玉米泛素)基因启动子驱动的CryIA(a)和CryIA(c)基因表达盒,将它们分别插入到用HindⅢ开环的pCAMBIA3300(含编码抗除草剂草丁膦的bar基因)载体上形成中间载体p3300-bt。采用Pfu高保真DNA聚合酶用PCR的方法从质粒pBI121-pta上扩增得到含CaMV35S启动子和NOS终止子的pta基因表达盒,然后插入到用SmaⅠ切开的中间载体p3300-bt中,获得带有抗性基因的双价抗虫基因表达载体p3300-bt-pta。通过根癌农杆菌介导的叶盘法转化烟草品种百日红,获得一批抗除草剂的转基因烟草植株。

引用

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共 4 条

[1] Bt杀虫基因与Bt转基因抗虫植物研究进展 [J].