苏云金芽孢杆菌B-Pr-88菌株中cry2Ab4基因的表达和杀虫活性研究

被引：18

作者：

李长友 ^{[1
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张杰 ^{[1
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宋福平 ^{[1
]}

韩岚岚 ^{[1
]}

李国勋 ^{[2
]}

黄大昉 ^{[3
]}

机构：

[1] 中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室

[2] 莱阳农学院植保学院

[3] 中国农业科学院生物技术研究所

来源：

生物工程学报 | 2007年 / 04期

关键词：

苏云金芽孢杆菌; cry2Ab4基因; 基因克隆; 蛋白表达; 杀虫活性;

D O I：

10.13345/j.cjb.2007.04.014

中图分类号：

S482.3 [杀虫剂];

学科分类号：

090403 ;

摘要：

以我室自行分离的对鳞翅目夜蛾科害虫具有高毒力的Bt菌株B-Pr-88为材料,用PCR-RFLP方法从其质粒DNA文库中筛选到含cry2Ab基因的一个阳性克隆pZF858,序列测定发现,该片段含有cry2Ab全长基因,开放读码框为1902bps,编码由633个氨基酸组成的70.7kD蛋白,氨基酸同源性与已公布的cry2Ab基因同源性均为99.8%,经Bt基因国际命名委员会正式命名为cry2Ab4。根据cry2Ab4基因开放阅读框架(ORF)两端序列,设计合成一对特异引物L2ab5和L2ab3,PCR扩增获得cry2Ab4完整ORF,与大肠杆菌表达载体pET-21b连接,构建了重组表达质粒pET-2Ab4,质粒导入大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导后,SDS-PAGE电泳证实该基因表达了60kD的蛋白,生物测定表明,Cry2Ab4对棉铃虫和大豆食心虫具有高毒力,同时对小菜蛾和二化螟有一定的杀虫活性,而对亚洲玉米螟和甜菜夜蛾没有杀虫活性。

引用

页码：634 / 638

页数：5

共 6 条

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