基于UPLC-Q-TOF/MS和模式识别技术阐释樟帮特色黄连水炒吴茱萸的炮制科学内涵

目的：分析黄连水炒吴茱萸炮制前后的化学成分变化，为深入阐明该饮片的炮制机制提供科学依据。方法：采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱法（UPLC-Q-TOF/MS）,Titank C18色谱柱（2.1 mm×100 mm,1.8μm），流动相为0.1%甲酸水溶液（A）-乙腈（B）进行梯度洗脱（正离子模式：0～0.01 min,5%B;0.01～20 min,5%～35%B;20～25 min,35%～45%B;25～50 min,45%～95%B;50～52 min,95%B;52～52.1 min,95%～5%B;52.1～55 min,5%B。负离子模式：0～0.01 min,5%B;0.01～25 min,5%～30%B;25～40 min,30%～55%B;40～45 min,55%～95%B;45～47 min,95%B;47～47.1 min,95%～5%B），柱温40℃，流速0.25 m L·min-1；电喷雾离子源（ESI），分别在正、负离子模式下扫描，扫描范围均为m/z 50～1 250。采用对照品比对、数据库匹配和文献参照对黄连水炒吴茱萸炮制前后化学成分进行鉴定，并通过Marker ViewTM1.2.1软件对所得数据归一化处理，应用SIMCA-P 14.1软件对生品和炮制品的MS数据进行主成分分析（PCA）和正交偏最小二乘法-判别分析（OPLS-DA），筛选炮制前后差异性成分。结果：共鉴定出50种化合物，其中黄连水炒吴茱萸48种、生品44种，炮制后新增了丹参素、降氧化北美黄连次碱、氧化小檗碱、原阿片碱、13-methylberberrubine、canadine共6种化合物，（S）-7-hydroxysecorutaecarpine、wuchuyuamideⅡ在炮制后未被检出，酚酸类和黄酮类成分在炮制后总体含量明显下降，柠檬苦素类成分含量总体有所上升，生物碱类成分含量总体下降不明显。PCA及OPLS-DA结果表明吴茱萸炮制前后化学成分的组成和含量存在明显差异，共筛选得到槲皮素、二氢吴茱萸次碱、去氢吴茱萸碱等12个炮制差异性成分。结论：黄连水炒吴茱萸中主要含有酚酸、黄酮、柠檬苦素及生物碱类成分，其炮制前后化学成分的组成和含量均发生了一定变化，炮制辅料的加入和热水浸泡是造成这一差异的主要原因，可为该樟帮特色炮制品种的炮制机制阐释提供实验依据。