苯肼诱发建立斑马鱼血栓模型的方法

目的 建立操作便捷、快速、稳定的活体斑马鱼血栓模型。方法 研究不同浓度苯肼诱导下斑马鱼血栓形成情况。以2dpf (days post fertilization, dpf,受精后天数)健康AB系野生型斑马鱼作为实验动物,将其暴露于不同浓度(0.5μmo L/L、1μmo L/L、2μmo L/L、4μmo L/L、8μmo L/L)的苯肼中,同时设置空白对照组(胚胎养殖用水)和溶剂对照组(0.1%乙醇),处理一段时间后,通过观察斑马鱼尾静脉血流及血栓形成情况进行定性分析,利用邻联茴香胺染色法对心脏红细胞染色强度进行定量分析。结果 苯肼处理组(模型组)有血栓形成，与溶剂对照组相比有显著性差异(P<0.001)。血栓形成率先增高后逐渐减缓, 0.5μmo L/L、1μmo L/L血栓形成较少,血栓形成率分别为(19.79±1.55)%、(43.28±1.82)%、2μmoL/L、4μmoL/L、8μmoL/L均诱发较为严重的血栓,血栓形成率分别为(69.85±1.12)%、(70.56±4.60)%和(72.25±2.11)%，三组间没有差异。结论 苯肼浓度2μmoL/L为诱发稳定的活体斑马鱼血栓模型的最佳浓度。