重度哮喘小鼠模型的建立

目的评价用呼吸道合胞病毒(RSV)诱导致敏小鼠建立重度哮喘模型的方法。方法采用随机数字表法将30只Balb/C小鼠分为3组:磷酸盐缓冲液(PBS)对照组、卵白蛋白(OVA)组和OVA/RSV组。采用OVA腹腔注射致敏、结合OVA持续雾化吸入及RSV(1.0×109pfu/L,50μl)多次滴鼻激发的方法复制重度哮喘动物模型。观察小鼠哮喘发作症状;用动物体描箱法测定肺功能变化,包括用力最大呼气流速(PEF)、第0.4秒用力呼气容积/用力肺活量(FEV0.4/FVC)及乙酰胆碱(Ach)激发条件下气道反应性以肺阻力(RL)表示;苏木素-伊红(HE)、过碘酸-希夫(PAS)、Masson染色观察动物肺组织大体变化、炎性细胞浸润、杯状细胞增生、黏液分泌及气道重塑变化,同时测定气道壁内径/外径比值及气道平滑肌层、网状基底膜层厚度。结果1以5.0、15.0和45.0g/LAch激发时,OVA组和OVA/RSV组RL、PEF和FEV0.4/FVC均较对照组差异有显著性(P均<0.01);与OVA组比较,OVA/RSV组小鼠喘息症状加重,RL明显升高,而PEF和FEV0.4/FVC则均明显下降(P均<0.01);气道黏膜下淋巴细胞、嗜酸粒细胞、中性粒细胞浸润明显加重,气道黏膜上皮增生、黏液分泌及气道周围胶原沉积增加。2OVA/RSV组气道壁内径/外径比值、气道平滑肌层和网状基底膜层厚度分别为0.56±0.03、(45.12±2.08)μm和(36.15±1.88)μm,OVA组分别为0.75±0.06、(24.63±0.94)μm和(21.68±1.13)μm,两组间及两组与对照组比较差异均有显著性(P均<0.01)。结论用RSV诱导致敏小鼠建立重度哮喘模型是有效的方法。