狗獾粪便DNA提取方法的初步探讨

被引：9

作者：

刘宇庆 ^{[1
,2
]}

吕慎金 ^{[3
]}

殷宝法 ^{[1
]}

范红梅 ^{[1
]}

刘燕 ^{[2
]}

魏万红 ^{[1
]}

机构：

[1] 扬州大学生物科学与技术学院

[2] 扬州市邗江区农林局

[3] 临沂师范学院农林学院

来源：

生态科学 | 2008年 / 06期

关键词：

狗獾; 粪便DNA; 提取; PCR扩增;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q781 [目的基因的获得];

学科分类号：

071007 [遗传学];

摘要：

在京杭大运河扬州段堤坝上采集狗獾的新鲜粪便,采用预处理-酚/氯仿抽提法、NaCl改良法、异硫氰酸胍裂解法、淀粉吸附法及QIAamp试剂盒法5种方法对粪便样品中狗獾DNA进行提取,探讨狗獾粪便样品中DNA提取方法和优化条件。结果表明,在5种提取方法中,淀粉吸附法的效果明显优于其它4种方法。采用粪便裂解液快速裂解细胞后,加入淀粉去除其中的大量PCR抑制物,然后用蛋白酶K裂解、酚/氯仿/异戊醇抽提,最后使用UNIQ-10柱纯化粪便DNA,对线粒体控制区和微卫星位点的PCR扩增反应及测序结果证实该方法的可行性。以上结果表明,通过该方法获得的粪便DNA能够用于更深入的分子遗传学等学科的研究。

引用

页码：468 / 473

页数：6

共 14 条

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