油茶SRAP标记的PCR体系建立与优化

被引：22

作者：

祝全东 ^{[1
]}

张党权 ^{[1
]}

李晓云 ^{[2
]}

杨书斌 ^{[2
]}

韩欣 ^{[1
]}

宋志丹 ^{[1
]}

刘作梅 ^{[3
]}

赵倩 ^{[3
]}

谢晓敏 ^{[3
]}

邝先松 ^{[3
]}

机构：

[1] 中南林业科技大学经济林育种与栽培国家林业局重点实验室

[2] 抚州市林业科学研究所

[3] 赣州市林业科学研究所

来源：

中南林业科技大学学报 | 2010年 / 30卷 / 03期

基金：

湖南省自然科学基金;

关键词：

经济林学; 油茶; 分子标记; SRAP; PCR; 体系优化;

D O I：

10.14067/j.cnki.1673-923x.2010.03.017

中图分类号：

S794.4 [油茶];

学科分类号：

0829 ; 0907 ;

摘要：

油茶是我国主要的木本食用油料树种,拟建立油茶新型SRAP标记(序列相关扩增多态性)的优化PCR体系。以油茶优良品种的总DNA为材料,分析了影响油茶SRAP-PCR的主要参数,包括模板DNA量、引物浓度、dNTPs、Mg2+浓度、TaqDNA聚合酶用量、退火温度6个因素的影响,建立了适合油茶SRAP-PCR的优化体系为:20μL的PCR反应体系中,2.0μL 10×PCR buffer,2.0 mmol/L Mg2+,225μmol/L dNTPs,0.6μmol/L引物,30 ng模板DNA和0.75 U Taq DNA聚合酶;最佳PCR循环条件为:94℃预变性5 min;94℃变性1 min,35℃复性1 min,72℃延伸1 min,5循环;94℃变性1 min,52℃复性1 min,72℃延伸1 min,35循环;最后72℃延伸10 min;4℃保存。本研究结果可为今后利用SRAP这一新型标记技术进行油茶分子遗传学与标记辅助选择育种研究打下基础。

引用

页码：57 / 62

页数：6

共 16 条

[1] SRAP标记体系优化及在茶树种质资源研究中的应用 [J].

沈程文 ;

黄意欢 ;

黄建安 ;

罗军武 ;

赵超艺 .

经济林研究 , 2009, (03) :1-6

[2] 山竹子基因组DNA提取及SRAP反应体系优化 [J].

邹明宏 ;

郭凌飞 ;

曾辉 ;

杜丽清 ;

陆超忠 ;

罗炼芳 ;

张汉周 .

经济林研究, 2009, 27 (03) :38-41

[3] 细叶桉ISSR-PCR体系的建立与优化 [J].

田华 ;

张党权 ;

谭晓风 ;

黄青云 ;

邓顺阳 ;

樊绍刚 ;

谷振军 .

经济林研究 , 2009, (01) :13-16+79

[4] 湖南宽皮柑橘SRAP的反应体系 [J].

曾柏全 ;

邓子牛 ;

杨迎花 ;

熊兴耀 .

中南林业科技大学学报, 2008, 28 (06) :71-74

[5] 红花檵木SRAP反应体系的建立及优化 [J].

李达 ;

熊兴耀 ;

于晓英 ;

彭尽晖 ;

吴莉英 ;

李炎林 .

中南林业科技大学学报, 2008, 28 (05) :22-27

[6] 油茶优良无性系ISSR分子鉴别 [J].

张国武 ;

钟文斌 ;

乌云塔娜 ;

谭晓风 ;

杜天真 .

林业科学研究, 2007, (02) :278-282

[7] 山茶属植物油茶组与金花茶组的分子分类 [J].

谭晓风 ;

漆龙霖 ;

贺晶 ;

桂君 ;

罗春清 ;

胡芳名 .

中南林学院学报, 2005, (04) :31-34

[8] 油茶优良无性系的RAPD分子鉴别 [J].

陈永忠 ;

张智俊 ;

谭晓风 .

中南林学院学报, 2005, (04) :40-45

[9] 油茶优良无性系及其丰产栽培技术要点 [J].

刘体应 .

中国林副特产, 2005, (03) :40-40

[10] 主要番茄品种的分子鉴别研究 [J].

于拴仓 ;

柴敏 ;

姜立纲 .

中国农学通报, 2005, (05) :84-89

← 1 2 →