鸡γ-干扰素实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立

被引：9

作者：

王群

刘光亮

童铁钢

肖一红

吴东来

机构：

[1] 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所

来源：

中国兽医科学 | 2007年 / 07期

基金：

黑龙江省自然科学基金;

关键词：

鸡γ-干扰素; 实时荧光定量RT-PCR; 检测方法;

D O I：

10.16656/j.issn.1673-4696.2007.07.018

中图分类号：

S852.4 [家畜免疫学];

学科分类号：

090602 ;

摘要：

为建立一种检测鸡γ-干扰素的实时荧光定量RT-PCR方法,采用RT-PCR方法从ConA诱导活化的鸡脾淋巴细胞的总RNA中扩增得到鸡γ-干扰素(ChIFN-γ)和鸡的28 SrRNA(Ch28 S)基因,将其分别克隆至体外转录载体后经体外转录获得了ChIFN-γ和Ch28 S的RNA,采用各自的特异性引物及Taqman探针,以Ch28 S RNA作为内参进行一步法实时荧光定量RT-PCR,检测ChIFN-γ。结果表明:ChIFN-γ和内参Ch28 S的Ct值与标准品稀释梯度在1×102～1×107拷贝/μL范围分别呈良好的线性关系,r2均大于0.99。此方法用于检测ChIFN-γ,具有简便、高效、敏感、特异的特点。

引用

页码：631 / 635

页数：5

共 6 条

[1] 禽网状内皮组织增生病病毒感染SPF鸡对脾细胞中产生IFN-γ的影响 [J].