松材线虫纤维素酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

被引:3
作者
任慧杰 [1 ]
郭道森 [1 ]
赵博光 [2 ]
李荣贵 [1 ]
机构
[1] 青岛大学生物系
[2] 南京林业大学森林资源与环境学院
关键词
松材线虫; 纤维素酶; 基因克隆; 表达;
D O I
10.13306/j.1006-9798.2011.01.017
中图分类号
S763.1 [病害及其防治];
学科分类号
摘要
采用PCR技术克隆了松材线虫纤维素酶的编码基因BXC46,克隆基因与已报道的纤维素酶基因BXC10(GenBank登录号:FJ598020.1)的同源性高达99%,将其克隆到表达载体pET-15b上构建了表达载体pET-15b-BXC。将该重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株构建工程菌,SDS-PAGE分析表明,IPTG诱导了纤维素酶在工程菌中表达。采用Ni2+-NTA树脂亲和层析部分纯化了重组松材线虫纤维素酶,DNS法进行的活性测定表明,部分纯化的重组蛋白具有纤维素酶的活性,其最适温度为45℃,最适pH为4.0。
引用
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